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由于糖尿病慢性创面中细胞功能异常,血管生成障碍和病理微环境,加速伤口的愈合仍然具有挑战性。补充生长因子和调节氧化还原微环境被认为是治疗糖尿病创面的有效策略。本文设计构建了可促进角质形成细胞迁移并促进肉芽组织形成的2-N,6-O-硫酸化壳聚糖(26SCS)改性的聚(乳酸-乙醇酸共聚物)支架(S-PLGA),从26SCS对肝素结合型表皮生长因子(HB-EGF)的控制释放作用及保护氧化应激对正常人角质形成细胞损伤的角度,研究了26SCS改性的PLGA支架对HB-EGF生长因子的缓释行为以及对角质形成细胞在氧化应激条件下存活的保护作用。在此基础上,建立链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠的全层皮肤切除伤口模型,评价了S-PLGA支架对糖尿病创面愈合的修复效果。论文围绕上述的内容开展了如下研究: (1)26SCS/PLGA支架的制备及其对HB-EGF缓释和抗氧化效应 设计制备了磺化类肝素多糖2-N,6-O-硫酸化壳聚糖(26SCS)改性的聚(乳酸-乙醇酸共聚物)支架(S-PLGA)。利用26SCS与肝素结合生长因子间的亲和作用,延长了HB-EGF的持续释放时间。同时,研究发现,26SCS具有抗氧化作用,其对超氧自由基具有很强的清除活性,对羟自由基具有中等的清除活性,对过氧化氢具有较低的清除活性。26SCS在人角质形成细胞系(Ha-cat)中对H2O2诱导的氧化损伤表现出较强的保护作用。磺化壳聚糖改性的S-PLGA支架也具有保护Ha-cat免受氧化应激损伤的作用。 (2)携载HB-EGF的26SCS/PLGA支架促进糖尿病伤口愈合的动物实验研究。 构建糖尿病大鼠的全厚层切除伤口模型,研究了携载HB-EGF的26SCS/PLGA支架对于糖尿病大鼠伤口愈合的修复作用。研究表明,用携载HB-EGF的S-PLGA支架处理的伤口在28天基本上愈合。与之相比,其他糖尿病组的伤口均未愈合。26SCS有利于生长因子HB-EGF的可持续释放,同时创面上ROS的清除可快速再上皮化,增强角质形成细胞的迁移效应。组织学评价表明,携载HB-EGF的S-PLGA组对伤口收缩、上皮再生和胶原沉积具有积极作用。这些研究表明26SCS可有效控制生长因子释放和减少创面环境中ROS含量,从而有利于糖尿病伤口的愈合。此外,单纯的S-PLGA支架也可促进糖尿病伤口的快速再上皮化。由此,磺化壳聚糖可作为一种保护生物生长因子和调节创面氧化应激的活性成分,促进创面愈合。