失活酵母菌对猕猴桃汁中氯吡脲的去除方法及机理研究

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氯吡脲是一种新型的苯基脲类植物生长调节剂,其主要作用是促进细胞分裂和体积增大,因此被广泛的用于猕猴桃种植中提高其产量。近年来,受经济效益的驱使,部分生产者大量使用氯吡脲,导致其在食品中的残留量超标,对人体健康造成潜在的危害,寻求一种安全高效的去除方法是目前产业急需。本研究首先筛选出高效吸附猕猴桃汁中氯吡脲的失活酵母菌,考察了失活酵母菌粉添加量、氯吡脲初始质量浓度、吸附温度、吸附时间以及pH等因素对氯吡脲吸附效果的影响;优化了氯吡脲的吸附条件,建立了吸附动力学模型和热力学模型;对失活酵母菌吸附猕猴桃汁中氯吡脲的机理进行了初步的探究。主要研究结果如下:(1)通过十株不同酵母菌的生物量、对氯吡脲的吸附率以及吸附后对猕猴桃汁品质的影响来综合评价,筛选出了高效吸附猕猴桃汁中氯吡脲的失活酵母菌SC5,在后续试验中选取SC5作为试验菌株。(2)随着失活酵母菌粉用量的增加,氯吡脲的吸附率表现出增加趋势,当失活酵母菌粉添加量为32 mg/mL时,氯吡脲的吸附达到平衡状态;随着吸附时间的延长,失活酵母菌对猕猴桃汁中氯吡脲的吸附率先升高后降低,最后达到吸附平衡,当吸附时间为2 h时,对氯吡脲的吸附率达到最大值;随着氯吡脲初始浓度和温度的不断增加,失活酵母菌对氯吡脲的吸附率逐渐减小;随着溶液pH值升高,失活酵母菌对氯吡脲的吸附率也随之增加,在pH=5.0时吸附率达到最大值。用响应面法优化失活酵母菌吸附猕猴桃汁中氯吡脲的最佳条件为:失活酵母菌粉添加量为28 mg/m L、氯吡脲初始浓度为0.2μg/mL、吸附时间为3 h。在此条件下吸附率达到97.02%。(3)试验获得了293 K、301 K和310 K下失活酵母菌SC5对猕猴桃汁中氯吡脲的吸附动力学曲线,随着吸附过程的进行,SC5对氯吡脲的吸附量先增加后降低,最终达到吸附平衡。准二级动力学方程能更好的拟合SC5对猕猴桃汁中氯吡脲的吸附行为,当氯吡脲初始质量浓度为0.5-10μg/mL时,氯吡脲在失活酵母菌SC5上的吸附平衡数据与Freundlich等温吸附模型拟合性最好。该吸附过程是一个自发进行的、放热、熵减小的过程。(4)通过失活酵母菌不同部位对氯吡脲的吸附效果研究,无法推断哪个部位在氯吡脲吸附过程中起着主导作用。但是由于失活酵母菌在吸附氯吡脲的过程中最先接触到的是酵母菌的细胞壁,因此在后续试验中主要从细胞壁着手进行机理的探究。失活酵母菌细胞壁不同组分对氯吡脲的吸附结果表明,细胞壁上的蛋白质在氯吡脲吸附过程中起着非常重要的作用,而脂类物质对氯吡脲的吸附没有贡献。由不同化学修饰的失活酵母菌对氯吡脲的吸附效果及其菌体表征分析,表明失活酵母菌对氯吡脲的吸附主要是由酵母细胞表面的有机官能团氨基、羟基和羧基等完成的,而且这种作用具有一定的稳定性,这些活性基团的含量在吸附过程中也起着非常重要的作用,另外氢键相互作用和疏水相互作用对氯吡脲的吸附也有一定程度的贡献。解析试验结果表明失活酵母菌对氯吡脲的吸附过程包括可逆吸附和不可逆吸附。
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