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目的:通过小鼠成肌细胞分化过程中添加PPARδ特异性激动剂GW0742和拮抗剂GSK0660的方法,研究小鼠成肌细胞分化过程中肌球蛋白重链(MHC)亚型的表达水平,进一步探讨PPARδ在成肌细胞分化过程中对肌纤维类型的影响。方法:培养C2C12成肌细胞株和新生昆明小鼠原代成肌细胞。各自分为三组,分别为对照组(DMSO组)、PPARδ激动剂组(GW0742组)、PPARδ拮抗剂组(GW0742+GSK0660组)。培养各组细胞至90%左右汇合度时,C2C12细胞株换生长培养基(DMEM培养基+10%FBS)为分化培养基(DMEM培养基+2%HS),小鼠原代成肌细胞换生长培养基(F10培养基+20%FBS+5ng/ml鼠bFGF)为分化培养基(DMEM培养基+2%HS);分别在C2C12成肌细胞株分化培养基培养的第4、8、12天和昆明小鼠原代成肌细胞分化培养基培养的第2、4、6天收取细胞样品;MHC免疫荧光鉴定成肌细胞分化情况;q-RT-PCR检测MHC各亚型和PPARδ表达情况。结果:(1)C2C12成肌细胞分化第4天,MHC免疫荧光可见有肌管形成,三组细胞分化形成的肌管数量大致相当;分化第8天和12天,PPARδ激动剂组形成的肌管数量显著大于其余两组。(2)小鼠原代成肌细胞分化第2天,MHC免疫荧光可见PPARδ激动剂组形成的肌管数量显著大于对照组;分化第4天和第6天,PPARδ激动剂组形成的肌管数量显著大于其余两组。(3)C2C12成肌细胞分化的第4天,PPARδ激动剂组MHC各亚型表达量均显著高于其余两组;分化第8天,PPARδ激动剂组MHCⅠ和MHCⅡx表达量较对照组相比上调大于2倍,MHCⅡa上调大于3倍;分化第12天,MHCⅠ表达量较对照组相比上调大于3倍,MHCⅡa上调大于4倍。(4)原代成肌细胞分化第2天,PPARδ激动剂组MHCⅠ、MHCⅡa表达量较对照组相比上调大于2倍,分化第4天,MHCⅠ、MHCⅡx表达量较对照组相比上调大于2倍,MHCⅡa表达量上调大于3倍;分化第6天,MHCⅠ表达量较对照组相比上调大于4倍,MHCⅡa表达量较对照组相比上调大于6倍。结论:1 PPARδ可以促进小鼠成肌细胞分化。2 PPARδ在C2C12成肌细胞株和小鼠原代成肌细胞分化过程中显著上调氧化型纤维的表达量。