“活血利水”法指导丹参防治肾病应用与丹参素调节AQP1效应观察

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目的:探讨“活血利水”法指导丹参防治肾病应用的可能性。通过丹参单体丹参素调节HUVEC-AQP1(水通道蛋白)效应的观察,验证AQP1可能是“瘀水关联”的分子标靶之一。  方法:通过体外培养的方法,研究不同浓度丹参素(丹参素低、中、高剂量组浓度分别为:1.5、15、150μ g/ml)对人脐静脉血管内皮细胞及HUVEC-AQP1的作用。MTT法及细胞计数观察不同浓度丹参素对HUVEC的增值影响;渗透压反射系数值得测定观察丹参素对细胞通透性的影响;免疫荧光法观察不同浓度的丹参素与乙酰唑胺对HUVEC-AQP1的效应比较。  结果:HUVEC最多培养5-7代,5-7代以后,细胞出现变形,细胞生长速率与细胞之间的距离有关,细胞之间相互接触,其生长速率远远大于单个细胞生长。中、高剂量的丹参素可明显抑制HUVEC细胞的增殖,丹参素用药48h后对HUVEC细胞的增殖抑制明显,丹参素的剂量15ug/ml,就会抑制HUVEC细胞的增殖,随着药物浓度的增加,抑制率明显增加(P<0.05)。丹参素对HUVEC蛋白质渗透压反射系数无明显影响(P<0.05)。丹参素对HUVEC-AQP1的调节,与用药浓度正相关:丹参素中、高剂量对AQP1的调节效应明显。丹参素中剂量组与乙酰唑胺对照组作用效果相当,高剂量组明显优于乙酰唑胺对照组(P<0.05)。  结论:低剂量的丹参素可以促进HUVEC的增值,中、高剂量的丹参素可以抑制HUVEC的增值,尤其是用药48h后的增值抑制作用明显。丹参素对HUVEC的增值作用与剂量成反比,与作用时间成正比。丹参素对HUVEC蛋白质渗透压反射系数无明显影响,且中、高剂量丹参素可明显抑制HUVEC增值,但其对HUVEC-AQP1的调节却是增加的,充分的证明了丹参素调节AQP1的有效性。
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