豆制品转基因检测方法的研究

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近年来,转基因技术的研究取得了极大的发展。2013年,全球转基因作物种植面积为1.75亿公顷,与1996年的170万公顷相比,增长了100倍多。目前,对于转基因食品的安全性尚无定论,但出于其可能存在的不可预知的潜在危险,消费者纷纷要求对转基因食品具有知情权和选择权。根据我国的相关规定,销售的食品若含有转基因成分,应该予以标识,但实际生活中,很多产品都未按照规定进行标识,而进入加工环节的转基因原料更难以进行有效监管。因此,转基因产品的检测成为有效实施监管的一个重要工具。目前,常用的转基因食品检测方法主要为核酸定性PCR法,实时荧光PCR法及LAMP技术。对常用的检测方法进行比较研究,可选择合适的方法进行检测,从而提高检测的效率及准确度。本论文主要研究内容和结果如下:⑴豆制品DNA提取方法的比较与筛选。选取豆腐、豆干、油豆腐、腐竹、腐乳5种豆制品,分别用改良CTAB法、改良试剂盒法及磁珠法提取DNA,对提取得到的DNA的浓度、纯度等进行比较。结果表明,改良CTAB法虽然步骤繁复,但提取得到的DNA较好地满足研究要求,也能适用于5种不同的豆制品,单个样品的费用也较低,适合在大批量的检测中使用。⑵豆制品转基因成分检测方法的研究。在稳定性、灵敏度和特异性等方面,对核酸定性PCR法、实时荧光PCR法及LAMP技术进行比较。结果表明3种方法都能满足我国现行标准的检出限的要求,但不同外源基因的检出限有一定差别。⑶广州市售豆制品转基因情况的调查。采用改良CTAB法提取大豆DNA,利用核酸定性PCR法、实时荧光PCR法及LAMP技术对外源基因CaMV35S,NOS和EPSPS进行检测。研究结果表明,在检测的159份散装豆制品中,87份检出转基因成分;在48份预包装豆制品中,18份检出转基因成分。散装豆制品无任何食品标签,预包装豆制品也均无转基因食品标识,因此亟待加强监管。
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