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第一部分、猕猴吗啡成瘾的DNA甲基化机制 药物成瘾是一种不正常的学习记忆，并且形成的记忆持久，提示可能引起细胞和分子方面的改变。本实验采用经典的药物成瘾学习记忆模型—条件化位置偏好(Conditioned Place Preference，CPP)在非人灵长类动物—猕猴上建立吗啡相关学习记忆，然后在不同时间段取脑组织，运用荧光定量PCR(Real-TimeQuantitative PCR, RT-qPCR)的方法检测与DNA甲基化相关基因的改变。本实验中，猕猴分为3组，分别为空白对照组、食物CPP组、吗啡CPP组。其中吗啡CPP组又分为CPP形成后3天分离脑组织组和CPP后2-6个月分离脑组织组。我们所测定的脑区为药物成瘾通路上的脑区，包括内侧前额叶(Medial FrontalCortex，mPFC)、眶额叶(Orbital Frontal Cortex，OFC)、腹侧纹状体(VentralStriatum)、伏隔核(Nucleus Accumbens，NAc)、海马（Hippocampus，HiP）、杏仁核(Amygdala，Amy)，前岛叶(Anterior Insula, AI)和后岛叶(Posterior Insula,PI)。结果显示，我们在猕猴上成功建立了吗啡相关学习记忆，发现与DNA甲基化相关基因的转录水平，具有时间特异性:NAc、mPFC、OFC、HiP和AI中，DNA甲基化转移酶（DNA methyltransferases，DNMTs）的转录水平在吗啡CPP建立后的3天显著升高，在吗啡CPP建立后的2-6个月转录下降。丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶-1(serine/threonine protein phosphatase-1，PP1c)的转录水平改变发生在CPP建立后的2-6个月，3种异构体中发生变化较明显的是PP1cβ和PP1cγ。此外，在NAc、OFC、Amy中发现FosB(FBJ murine osteosarcoma viraloncogene homolog B)基因有转录改变。 第二部分、MCPH1过表达小鼠吗啡成瘾模型的建立 药物成瘾是一种不正常的学习记忆，其涉及到的细胞和分子机制仍然没有定论。实验室通过向宿兵实验室引进四种MCPH1过表达小鼠，并且之前已经在这些小鼠上做过水迷宫和Y迷宫等测试，发现MCPH1过表达小鼠有更好的学习记忆，而吗啡成瘾记忆和普通学习记忆不同，因此我们采用吗啡条件化位置偏好(Conditioned Place Preference，CPP)来测试MCPH1过表达小鼠的吗啡相关学习记忆。小鼠经过1天适应期，之后8天交替腹腔注射吗啡和无菌生理盐水，吗啡剂量为10mg/kg，检测期维持1天，检测期后的第3天和第7天作为消退期检测小鼠CPP的消退情况。MCPH1过表达小鼠共4种:转入猕猴的MCPH1基因(M)，分别为M10和M14;转入了人的MCPH1基因(Line)，分别为LineA和LineD，野生型(WT)作为对照组。结果显示，WT组的小鼠建立了极显著的CPP行为，并且在CPP后的第3天和第7天仍然具有对吗啡相关环境的明显偏好行为。除了M14未建立起CPP之外，其它三种基因型的小鼠均建立了CPP。但是，转基因型的小鼠，在第3天或第7天之后未见CPP行为，说明它们对吗啡所相关的记忆消退较快。