八角茴香提取物对两种储粮害虫的生物活性及代谢酶的影响

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玉米象是一种初期性储粮害虫,被国家粮食部门列为头号储粮害虫;长角扁谷盗为一种重要的后期性仓储害虫。植物源农药属于无公害绿色农药,害虫对其不易产生抗药性。为开发环境友好的植物源杀虫剂,本研究采用3种有机溶剂对八角茴香干果进行提取,探索八角茴香提取物对这2种储粮害虫的杀虫活性及其作用机理。研究获得主要结果如下:1不同溶剂对八角茴香干果的提取效果以甲醇、乙酸乙酯、石油醚3种有机溶剂采用冷浸法对八角茴香干果中的生物活性物质进行提取,3种有机溶剂对八角茴香干果的提取率从大到小依次为:甲醇>乙酸乙酯>石油醚。2八角茴香干果的不同溶剂提取物对两种储粮害虫的生物活性研究2.1八角茴香的3种溶剂提取物对两种储粮害虫的触杀作用分别设计了9.29、18.58、37.16、74.32、148.63μg/cm~2五个处理剂量,采用滤纸药膜法测定八角茴香3种溶剂提取物对玉米象和长角扁谷盗成虫的触杀效果。用148.63μg/cm~2剂量处理72h后,甲醇、乙酸乙酯和石油醚提取物对玉米象的校正死亡率分别为85.43%、94.50%和91.08%;对长角扁谷盗的校正死亡率分别为87.85%、90.98%和94.44%。在对玉米象的触杀实验中,乙酸乙酯提取物的作用最强;在石油醚提取物对长角扁谷的作用明显大于其它两种溶剂提取物。在相同剂量下甲醇、石油醚提取物对玉米象的作用效果大于其对长角扁谷盗作用效果,而乙酸乙酯提取物正好相反。八角茴香的3种溶剂提取物的触杀效果均随着处理剂量的增加而显著增强,显示了明显的剂量效应。甲醇、乙酸乙酯和石油醚提取物处理玉米象成虫72h后的LD50分别为36.11、21.19和24.65μg/cm~2,处理长角扁谷盗成虫72h后的LD50分别为28.21、23.51和19.23μg/cm~2,显示3种八角茴香提取物对玉米象、长角扁谷盗均有较强的触杀作用。2.2八角茴香的3种溶剂提取物对两种储粮害虫的驱避作用分别设计了7.72、15.43、30.86、61.73、123.46μg/cm~2五个处理剂量,采用滤纸药膜法测定八角茴香3种溶剂提取物对玉米象、长角扁谷盗成虫的驱避效果,八角茴香的同种溶剂提取物的剂量越高,其对玉米象和长角扁谷盗成虫驱避作用越大;甲醇、乙酸乙酯和石油醚3种溶剂提取物的最高剂量(123.46μg/cm~2)的对玉米象成虫的平均驱避率分别为:53.15%、76.88%和69.49%,其驱避等级分别为Ⅲ级、Ⅳ级和Ⅳ级;对长角扁谷盗成虫的平均驱避率分别为:62.23%、73.22%和40.16%,其驱避等级分别为Ⅳ级、Ⅳ级和Ⅲ级;八角茴香3种有机溶剂提取物对玉米象成虫驱避作用大小依次为:乙酸乙酯提取物>石油醚提取物>甲醇提取物,对长角扁谷盗成虫驱避作用大小依次为:乙酸乙酯提取物>甲醇提取物>石油醚提取物,说明在3种提取物中,乙酸乙酯的驱避作用最强,明显大于其它两种八角茴香提取物。2.3八角茴香的3种溶剂提取物对两种储粮害虫的熏蒸作用分别设计了1.25、2.5、5.0、10.0、20.0mg/L处理剂量,采用密闭容器熏蒸法测定八角茴香3种溶剂提取物对玉米象、长角扁谷盗成虫的熏杀效果,3种提取物对两种储粮害虫成虫均具有较强的熏杀作用,且3种提取物的熏杀效果均随着处理剂量的增加而显著增强。用最大剂量20.0mg/L处理72h后,甲醇、乙酸乙酯和石油醚提取物对玉米象的校正死亡率分别为90.26%、95.89%和92.57%;对长角扁谷盗的校正死亡率分别为89.93%、96.71%和91.56%。乙酸乙酯提取物对玉米象、长角扁谷盗的熏杀效果最强,甲醇提取物最弱。甲醇、乙酸乙酯和石油醚提取物处理玉米象成虫72h后的LD50分别为7.10、3.93和4.55mg/L,处理长角扁谷盗成虫72h后的LD50分别为7.16、4.57和5.42mg/L,显示八角茴香的3种溶剂提取物对长角扁谷盗、玉米象均有较强的熏杀作用。3八角茴香的不同溶剂提取物对两种储粮害虫体内酶活性的影响3.1八角茴香的3种溶剂提取物对两种储粮害虫体内解毒酶的剂量效应分别用20.0、10.0、5.0、2.5、1.25mg/L5种剂量的八角茴香3种溶剂提取物熏蒸处理试虫,24h时测定玉米象成虫体内AchE、GSTs活性的变化。结果表明:3种提取物对试虫体内的AchE、GSTs活性均表现出明显的剂量效应,随着处理剂量的升高,对2种酶活力的抑制作用表现为增强的效果,3种溶剂提取物对AchE、GSTs活性的抑制作用最强为乙酸乙酯提取物,其次为石油醚和甲醇提取物。分别用相同剂量的八角茴香3种溶剂提取物熏蒸处理试虫,24h时测定长角扁谷盗成虫体内AchE、GSTs活性的变化。结果表明:3种提取物对试虫体内的AchE、GSTs活性均表现出明显的剂量效应,随着处理剂量的升高,对2种酶活力多数表现为抑制作用增强,而低剂量(1.25mg/L)的甲醇提取物对AchE具有一定的诱导作用;3种溶剂提取物对AchE、GSTs活性的抑制作用大小均表现为乙酸乙酯>石油醚>甲醇。提取物对酶活性的抑制作用与熏杀效果整体呈正相关,说明AchE、GSTs活性下降可能是造成试虫死亡的重要原因之一。3.2八角茴香的3种溶剂提取物对两种储粮害虫体内解毒酶的时间效应分别用八角茴香3种溶剂提取物的LD50剂量处理玉米象成虫,12、24、36、48、60、72h时测定试虫体内AchE、GSTs活性的变化,结果表明:48h时,甲醇、乙酸乙酯提取物对AchE抑制作用最高,石油醚提取物在72h对AchE抑制作用最高。石油醚、甲醇提取物在48h时对GSTs抑制作用最高,乙酸乙酯提取物在60h对GSTs抑制作用最高。分别用八角茴香3种溶剂提取物的LD50剂量处理长角扁谷盗成虫,12、24、36、48、60、72h时测定试虫体内AchE、GSTs活性的变化,结果表明:八角茴香3种溶剂提取物对AChE、GSTs的活性均有明显的抑制作用,石油醚、乙酸乙酯提取物对AchE、GSTs抑制作用在48h时达到最高,而甲醇提取物在60h对AchE、GSTs抑制作用最高。
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