论文部分内容阅读
细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinases，ERK1/2)是丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases，MAPK)家族的经典转导通路之一，是目前研究最为广泛的ERK家族成员。ERK1/2可被MAPK酶(MEK1/2)激活，激活的MEK-ERK1/2信号引起ERK单体和二聚体的形成，然后通过被动扩散和主动运输的方式转入核内与核底物结合，调节转录因子(如Elk1，ATF2，Sap-1 α，c-myc，STAT等)及一些激酶的活性，进而调节转录因子的靶基因如即早基因(IEG，如c-fos)、后期效应基因和热休克基因等的表达，促进蛋白合成，完成对细胞外刺激的反应。一般认为ERK通路在促进神经元细胞增殖、分化及抑制细胞凋亡中发挥重要作用。其在预处理适应性保护作用中的研究日渐受到重视，越来越多的资料表明ERK在预处理中具有重要作用。研究表明ERK参与了药物或缺血预处理诱导的心肌延迟保护作用，参与了氧化应激预处理和肾脏缺血预处理的肾保护作用，但其是否参与H<,2>O<,2>预处理诱导的适应性细胞保护作用尚有待于阐明。
信号转导和转录激活因子(Signal transducers and activators of transcription， STATs)是一类脱氧核糖核酸(DNA)结合蛋白，由750～850个氨基酸组成，哺乳动物中STAT家族成员包括STAT<,1>、STAT<,2>、STAT<,3>、STAT<,4>、STAT<,5A>、STAT<,5B>和STAT<,6>等7种亚型。非受体型酪氨酸激酶超家族中Janus激酶(JAK)家族及信号转导转录活化蛋白家族STATs是细胞对细胞因子、生长因子等刺激因子等反应的一些基本蛋白分子，构成细胞因子信号转导的经典途径JAK-STAT途径。细胞因子激活JAK，后者磷酸化STAT，从而激活STAT蛋白，激活前的STAT蛋白属于胞浆蛋白，而活化后的STAT则以同源或异源二聚体的形式移位到胞核，在靶基因的启动子区域与特定的DNA元件结合，发挥其生物学活性。STA3广泛表达于不同类型的细胞和组织中，参与细胞生长，恶性转化凋亡等功能的调控，近年来以后大量实验证实STAT3与中枢神经系统疾病、肿瘤、心血管系统疾病等多种病理生理过程有着密切的关系。目前研究发现STAT可能是MAPK的天然底物之一，细胞中可能存在着MAPK-STAT这一信号转导的旁路调节方式，具体机制不明。另外，我们实验室的余惠旻等研究证实100 μmol/L H<,2>O<,2>预处理可以诱导STAT3的酪氨酸磷酸化以及核转移，激活JAK-STAT信号通路，发挥适应性神经细胞保护作用。但ERK1/2信号通路在H<,2>O<,2>预处理诱导的适应性细胞的保护中的作用及其机制尚未见报道，根据国内外对ERK1/2及STAT3在预处理作用中的研究，推测，可能存在ERK1/2-STAT3信号通路介导H<,2>O<,2>预处理的适应性细胞保护作用。为此，本研究主要探讨：(1)100 μmol/L H<,2>O<,2>预处理对PCI2细胞ERK1/2蛋白表达的影响；(2)100 μmol/L H<,2>O<,2>预处理的适应性细胞保护是否和ERK1/2蛋白的活性有关；(3)ERK1/2-STAT3信号通路是否参与了100 μmol/LH<,2>O<,2>预处理对抗氧化应激诱导的凋亡和细胞毒性方面的作用。