论文部分内容阅读
胶原特殊的结构使之具有重要的生物功能。胶原显著的低免疫原性、生物相容性、可降解性,及止血功能是作为生物材料的优势,并且在生物体内容易被吸收、亲水性强、无毒安全性好,因此,已被认为是最有用的天然生物材料之一。其中,以膜形式的胶原材料在生物领域的应用最为多见,研究的也较多。 胶原的提取方法有多种,盐法和碱法各有缺点,而酸法和酶法均有优势。论文第一部分以酸溶解法,酸溶解加酶处理法提取胶原,对影响提取的主要因素:pH值、酶用量变化进行重点研究。结果表明,当pH=1.7~2.0内酸溶解法提取胶原时,大部分胶原能在30h内溶出,溶出率达到0.0303~0.0506%,是50h溶出率值的82.7%~82.8%,即使再经过20h的溶解,溶出率也只能上升16.7%。所以,从实际生产角度来看,酸溶解胶原控制在30h左右较合适。同样地,酸溶解加酶处理法提取胶原,条件控制在pH=1.9~2.1,酶用量40∶1,时间30h较为合适。酸溶解+酶处理提取胶原时的溶出率是酸溶解时的3.73倍,酶法更适合于生产。将胶原二次纯化,用氨基酸分析、傅立叶变换红外定性分析、差示扫描量热测定几种手段对其表征,显示胶原样品基本保留了三股螺旋结构,与天然胶原的相符性较好,液相色谱测定表明样品的分子量M_r>160000。 用提取出的胶原样品冷冻干燥成膜,根据生物膜材料的特性要求,论文第二部分选用了具有独特和多样的生理、药理活性的单宁酸为交联剂,通过考察交联后胶原膜的热稳定性温度和抗酶降解性,来验证其交联度和生物稳定性。实验结果表明,胶原膜对单宁酸溶液的吸收量可达15~34%,单宁酸溶液浓度越高,胶原膜吸收的单宁酸就越多。在交联过程中,吸收量与T_m变化基本成正比关系。单宁酸浓度为12.5%时,胶原膜对单宁酸的吸收量为34%,且T_m可达到81℃,与戊二醛交联胶原膜的T_m接近。这时,在胰蛋白酶溶液中,单宁酸交联胶原膜基本不发生降解,生物稳定性好,而戊二醛交联的胶原膜稳定性相对弱地多,未交联的胶原膜对酶降解最敏感。结果表明,单宁酸交联胶原有较高热稳定性,且抗酶解能力强,生物稳定性好,适于用作生物材料。