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目的：强直性脊柱炎（Ankylosing spondylitis，AS）是一种慢性、进行性、炎症性自身免疫病，以侵犯骶髂关节和脊柱等中轴系统为主，亦可不同程度累及外周关节及肌腱附着点。其特征性病理变化为韧带及肌腱附着点炎症，脊柱周围组织骨性强直并伴有局部骨质疏松。其病因及发病机制尚不明确。我国AS患病率为0.3%左右,其中60%左右的患者髋关节受累，久之累及脊柱发生骨性强直，导致残疾。骨破坏及新骨形成是AS致残的关键原因。近年相关研究表明，破骨细胞（osteoclast,OC）在AS骨质破坏及骨质疏松的病理机制中起着重要作用。而成骨细胞和破骨细胞的不平衡在骨病变中起到决定性作用。在炎性骨破坏的整个过程中，一些促炎细胞因子并不直接作用于破骨细胞的分化和激活，而是通过调节肿瘤坏死因子（TNF）超家族中的细胞核因子κB受体活化因子配体（Receptoractivator of nuclear factors κB ligand，RANKL）、细胞核因子κB受体活化因子（Receptor activator of nuclear factors κB，RANK）、骨保护素（osteoprotegerin，OPG）等分子间接发挥作用。RANKL、RANK、OPG为调节破骨细胞活性所必需，是造成炎性关节骨质破坏最重要的影响因素。而Wnt/β-catenin信号通路对调节骨重塑具有重要作用，Dickkopf-1（DKK-1）、硬骨素（Sclerostin,SOST）为其中的关键因素。本研究拟通过检测活动性AS患者外周血清中巨噬细胞移动抑制因子（macrophage migration inhibitory factor，MIF）、白介素-23（Interleukin-23，IL-23）、RANKL、OPG及DKK-1、SOST的表达，并以活动性类风湿关节炎（RA）患者和健康人为对照，了解促炎症细胞因子MIF、IL-23与骨破坏/骨重塑因素、疾病活动性指标的相关性，以及中医证型与炎性细胞因子、骨破坏/骨重塑因素的相关性，试图进一步探讨AS活动期炎症与骨质破坏的病理机制，为改善骨代谢和延缓骨质破坏寻找新的治疗靶点，并获得活动性AS中医辨证的实验依据，为中西医结合诊治AS探索新的思路和方法。方法：选择活动性AS住院患者30例为实验组，同期选择活动性类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis,RA）住院患者30例和15例正常健康体检者作为对照组，并将实验组患者根据中医辨证进行分型；分别记录AS和RA患者的年龄、性别、病程、红细胞沉降率（ESR）采用魏氏法、C反应蛋白（CRP）采用全自动免疫速率散射比浊法测定。采用BASDAI（Bath ankylosing spondylitis disease activity index）和DAS（Disease activityscore）28分别评价AS和RA病情活动度。清晨空腹采肘静脉血留取血清标本。采用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测AS患者、RA患者和健康人外周血IL-23、MIF和RANKL、OPG及DKK-1、SOST的水平。进行炎症细胞因子与骨代谢细胞因子的相关性分析，并进一步分析上述炎症和骨代谢细胞因子与AS临床指标、中医辨证分型的相关性。统计学处理：所得数据均采用SPSS13.0软件包进行统计学处理，计量资料所得结果以均数±标准差（±s）表示。若方差齐，各组间均数比较采用单因素方差分析（one-wayANOVA），采用LSD法进行组间两两比较；方差不齐，采用非参数检验。相关性分析采用Pearson相关检验。计数资料采用卡方检验。均以P＜0.05或P＜0.01认为有统计学意义。结果：1一般资料描述AS组：男性25例，女性5例；年龄（18-58）岁，平均年龄（29.43±8.33）岁；病程（0.3-20）年，平均病程（6.73±4.18）年；RA组：男性5例，女性25例；年龄（15-75）岁，平均年龄（46.07±14.79）岁；病程（0.2-16）年，平均病程（4.99±5.15）年；正常对照组男性3例，女性12例，平均年龄（30.20±5.20）岁。AS组： BASDAI （3.94±1.65）； ESR（40.25±29.79）mm/h； CRP（4.78±3.40）mg/dl；RA组：DAS28（6.06±1.25）；ESR（69.79±27.46）mm/h；CRP（4.31±4.25）mg/dl。2血清IL-23（pg/ml）水平比较AS组的IL-23水平（74.90±42.24）高于正常对照组（43.32±16.06），但低于RA组（146.60±117.46），组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。AS组IL-23水平与RA组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。3血清MIF（ng/ml）水平比较AS组MIF水平（25.38±11.05）高于正常对照组（20.58±6.44），低于RA组（37.70±14.19），组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。AS组MIF水平与RA组相比差异有统计学意义（P＜0.05）。4血清RANKL（pg/ml）水平比较AS组RANKL水平（21.53±17.44）高于正常对照组（8.39±5.88）和RA组（12.12±9.72），但组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。AS组RANKL水平与RA组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。5血清OPG（pg/ml）水平比较AS组OPG水平（5.04±1.65）高于正常对照组（3.39±1.02），但低于RA组（8.48±3.61），组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。 AS组OPG水平与RA组相比差异有统计学意义（P＜0.05）。6血清DKK1（ng/ml）水平比较AS组DKK1水平（0.71±0.16）高于正常对照组（0.66±0.20）和RA组（0.70±0.28），但组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。AS组DKK1水平与RA组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。7血清SOST（ng/ml）水平比较AS组SOST水平（1.39±0.53）高于正常对照组（0.98±1.02）和RA组（1.43±0.55），但组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。AS组SOST水平与RA组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。8AS患者血清中炎性细胞因子IL-23、MIF水平与临床疾病活动指标的相关性AS患者血清IL-23水平与病程、ESR、CRP和BASDAI均无相关性（r=-0.142，0.088，-0.018，-0.421，P＞0.05）；血清MIF水平与病程呈显著正相关（r=0.496，P＜0.01），与ESR、CRP和BASDAI均无相关性（r=0.361，0.299，0.270，P＞0.05）。9AS患者血清中骨代谢指标RANKL、OPG、DKK1、SOST水平与炎性细胞因子IL-23、MIF水平、临床疾病活动指标的相关性AS患者血清中RANKL水平与病程、ESR、CRP、BASDAI、IL-23、MIF、OPG、DKK1、SOST均无相关性（r=-0.116，0.003，0.147，0.069，-0.008，0.314，0.119，-0.199，0.163，P＞0.05）；OPG水平与病程呈显著正相关（r=0.520，P＜0.01），与ESR呈正相关（分别为r=0.379，P＜0.05）,与CRP、BASDAI、IL-23、MIF、DKK1、SOST均无相关性（r=0.338，0.173，0.379，0.759，0.099，0.252，P＞0.05）；DKK1水平与BASDAI呈正相关（r=0.414，P＜0.05），与病程、ESR、CRP、IL-23、MIF、SOST均无相关性（r=0.128，0.099，-0.013，-0.105,0.087，P＞0.05）；SOST水平与病程、ESR、CRP、BASDAI、IL-23、MIF均无相关性（r=-0.242，0.266，0.354，-0.206，0.020，0.200，P＞0.05）。10AS组中医证型分布及临床相关指标、血清中炎性细胞因子IL-23、MIF水平和骨代谢指标RANKL、OPG、DKK1、SOST水平与各证型的关系10.1AS组中医证型分布：湿热痹阻型3例（10%）、寒湿痹阻型8例（27%）、瘀血痹阻型14例（47%）、肾阳亏虚型2例（6%）、肝肾不足型3例（10%）。可见活动性AS患者中主要为瘀血痹阻型。10.2AS组中医证型与年龄、病程、影像学分级的关系10.2.1肝肾不足型的年龄（40.00±9.17）最大，湿热痹阻型（27.33±10.69）最小，在各证型之间差异无统计学意义（P＞0.05）。10.2.2肝肾不足型的病程（14.33±1.53）最长，湿热痹阻型（4.33±2.47）最短，病程在各证型之间有显著性差异（P＜0.01）。10.2.3AS组骶髂关节X线分级在各证型之间差异无统计学意义（P＞0.05）。10.3AS组中医证型与ESR、CRP、BASDAI的关系各型中ESR、BASDAI的差异无统计学意义（P＞0.05），而CRP的差异有统计学意义（P＜0.05）。10.4AS组中医证型与IL-23、MIF水平的关系血清IL-23水平在各型中差异有统计学意义（P＜0.05），其中寒湿痹阻型（112.20±57.68）最高；血清MIF水平在各型中的差异无统计学意义（P＞0.05）。10.5AS组中医证型与RANKL、OPG、DKK1、SOST的关系血清SOST水平在各型中的差异有统计学意义（P＜0.05），RANKL、OPG、DKK1水平在各型中差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：1活动性AS患者存在骨代谢异常，血清RANKL、OPG水平明显升高；并且，随着病程的延长，新骨形成机制在关节结构改变过程中发挥主要作用；IL-23、MIF可能通过介导炎症反应间接参与AS骨代谢。2活动性AS患者血清DKK1和SOST水平与ESR、CRP、BASDAI、IL-23、MIF无相关性，可能独立参与活动期AS的发生、进展过程，并可作为进一步研究和干预AS骨代谢异常的新靶点。3传统中医辨证分型提示，瘀血痹阻证为活动性AS的主要证型；不同证型间病程及血清CRP、IL-23和SOST水平存在明显差异；骶髂关节影像学分级与证型分布无明显相关性。现代临床和实验室相关定量/定性指标可能作为活动期AS的中医辨证的客观证据。