VanM基因阳性屎肠球菌分子生物学特征以及临床感染控制的研究

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目的:本研究通过分析一位新型vanM基因阳性耐万古霉素屎肠球菌(VRE)血流感染患者的临床表现,临床及周围环境45株vanM基因阳性屎肠球菌的分子生物学特征,有助于进一步认识这种新型vanM型耐万古霉素肠球菌感染的特征及相关的预防治疗措施。方法:收集和分析患者的临床资料,按照我国2012年发布的医院消毒卫生标准,进行周围环境采样、送检培养。送检的标本做了以下的检测:MALDI-TOFMS确定分离菌株为屎肠球菌。E-test法测定8种抗生素对屎肠球菌的最小抑菌浓度(MIC)。脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分析(MLST)确定菌株之间的同源性。多重聚合酶链反应(PCR)检测万古霉素屎肠球菌耐药基因及毒力基因。质粒接合试验验证vanM基因是否可以转移。根据结果分析比较临床和环境菌株的分子生物学特征。同时,院感科为预防该基因型耐药菌株进一步传播,对该感染患者进行接触隔离并对患者周围环境进行严格消毒。结果:一位51岁男性患者因为反复头痛和肢体活动障碍入院。头颅磁共振(MRI)检查提示脑脓肿。患者在立体定向穿刺引流术后转入我院中心监护室(ICU)进一步治疗。入科后立即留取血液、痰液、颅内穿刺引流液进行培养,予广谱抗生素亚胺培南-西司他丁(0.5g,q6h)和万古霉素(1.0g,q12h)经验性抗感染治疗。入ICU后第4天,患者反复发热,再次留取血培养,3天后结果回报示vanM基因阳性VRE,根据药敏结果,停用万古霉素,改为利奈唑胺。尽管临床症状逐渐好转,入ICU后第10天患者出现腹泻,粪便培养示vanM基因阳性VRE,加用蒙脱石散止泻治疗。入ICU第13天我院院感科对该患者周围环境采样培养,结果示周围环境存在大量vanM基因阳性VRE,而从周围患者的环境中未发现耐药菌株。留取43株环境和2株临床来源VRE进行分子生物学研究。PFGE显示,45株携带vanM基因的屎肠球菌分为4个不同的克隆,MLST显示两种序列分型(sequence type),ST564和ST78。患者周围环境的vanM基因阳性VRE在进行环境消毒后被清除。通过严格执行感染控制措施,有效的阻止了 vanM基因阳性VRE感染的爆发。入ICU后12天该患者转至脑外科病房,3天后患者至当地医院康复锻炼。结论:本研究提示携带vanM基因的VRE易于在肠道和患者周围环境定植,但是通过及时治疗和采取有效的感染控制措施,血流感染患者能得到良好的预后,通过严格实施感控措施,可以有效预防爆发流行。
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