壳基质蛋白及胰岛素相关多肽受体在贝壳生长形成过程中发挥重要的作用,对其基因表达的研究可以促进珍珠贝生长机制及其生长内源调控机制的深入研究。本论文以马氏珠母贝(Pinctada fucata Gould)为研究对象,利用实时定量PCR分析了壳生长形成相关基因在相同家系不同生长期之间、相同生长期不同大小个体之间、相同个体不同组织之间的表达差异及其与生长的相关性,以及外源激素对马氏珠母贝壳生长形成相关基因表达的影响,主要结果如下:　　 (1)通过分析aspein、prismalin-14、n16、n19、nacrein、efcbp、msi7与胰岛素相关多肽受体基因irr基因在马氏珠母贝各组织器官中的不同表达水平,研究壳生长形成相关基因的组织表达模式。aspein、prismalin-14、n16、n19、nacrein与msi7等基质蛋白基因均在外套膜中具有较高的表达水平,而在肌肉、消化腺及腮组织中的表达极低或检测不到特异性产物,说明它们特异参与贝壳的生长形成过程；efcbp在外套膜与腮中均有较高表达,说明EFCBP蛋白可能是贝壳生长形成中一个广泛的参与因子。irr在各组织中广泛表达,说明胰岛素相关多肽受体既参与珍珠贝的壳生长形成过程,又参与其软体部各组织的生长代谢及生物体的生殖发育。　　 (2)检测 aspein、prismalin-14、msi31、n16、n19、msi60、nacrein、efcbp、msi7、accbp与真rr在外套膜边缘褶皱区(ME)与其内侧缘膜区(MP)的表达水平,研究壳生长形成相关基因在马氏珠母贝外套膜中的表达模式。结果发现,珍珠层基质蛋白基因(n16、n19与msi60)在MP中具有较高的表达水平,而在ME中的表达量极低。而棱柱层基质蛋白基因(aspein、prismalin-14与msi31)及两层共存在的基因(nacrein、efcbp、msi7、accbp与irr)在ME与MP两个部位均显示较高的表达水平,说明外套膜边缘褶皱区是负责棱柱层形成的区域,而其内侧缘膜区域在贝壳两个矿化层的生长形成过程中均发挥作用。　　 (3)aspein、prismalin-14、n16、nacrein与n19基因在不同大小个体间的表达水平变化趋势在两个生长期中一致。aspein、prismalin-14、n16与nacrein以及单独在20月龄珍珠贝中研究的msi31、msi60与accbp基因水下均随珍珠贝个体的增大而升高,与壳高壳重正相关；n19基因表达水平下降,与壳高壳重负相关。两个生长期中,均发现棱柱层基质蛋白基因(aspein、prismalin-14及msi31)与壳高的相关性大于壳重,珍珠层基质蛋白基因(n16、n19及msi60)与壳重的相关性大于壳高,与其在贝壳生长过程中的功能作用相一致。irr基因在20月龄珍珠贝不同大小个体中的表达水平无显著性差异。发现20月龄珍珠贝nacrein基因表达水平较12月龄升高,而aspein、prismalin-14、efcbp与msi7基因表达均有一定程度的下降,说明在珍珠贝不同生长期基质蛋白基因表达水平亦有所不同。　　 (4)通过分析马氏珠母贝irr、nacrein、efcbP、n19、aspein与accbp基因在人重组生长激素(HGH)处理组、人重组胰岛素样生长因子-Ⅰ(hrIGF-Ⅰ)处理组及对照组中表达水平的差异,研究了HGH与hrIGF-Ⅰ对马氏珠母贝壳生长形成相关基因表达的影响。结果表明,激素处理显著提高了irr基因表达水平,表明胰岛素相关多肽受体参与了机体激素调节过程。与对照组相比,efcbp基因表达水平在激素处理组无显著变化；nacrein表达升高,而n19、aspein与accbp基因均降低,说明基质蛋白基因的表达受外源激素的调节。为珍珠贝生长形成的内分泌调节机制的深入研究提供了基础资料。