【摘 要】
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目的:观察在肾脏缺血再灌注状态下,硫化氢（H2S）是否能够通过上调Nrf2/HO-1信号通路,抑制氧化应激,在缺血性急性肾损伤起到保护作用。方法:将24只雄性SD大鼠,按随机法分为假手术组（Sham组）、肾脏缺血再灌注（I/R）组和I/R+Na HS组,每组有8只;预处理:将大鼠用10%水合氯醛（0.3ml/100g）进行腹腔注射麻醉,选取腹部正中切口,逐层切开各层组织,暴露腹腔及双肾动脉,分离肾
【基金项目】
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硫化氢通过Nrf2/HO-1通路调节TLR2/TLR4在缺血性急性肾损伤中保护机制研究（编号sz2019011）,山西省“136”兴医工程专项基金（SZ2019011）
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目的:观察在肾脏缺血再灌注状态下,硫化氢（H2S）是否能够通过上调Nrf2/HO-1信号通路,抑制氧化应激,在缺血性急性肾损伤起到保护作用。方法:将24只雄性SD大鼠,按随机法分为假手术组（Sham组）、肾脏缺血再灌注（I/R）组和I/R+Na HS组,每组有8只;预处理:将大鼠用10%水合氯醛（0.3ml/100g）进行腹腔注射麻醉,选取腹部正中切口,逐层切开各层组织,暴露腹腔及双肾动脉,分离肾蒂周围组织,结扎右肾肾蒂,将右肾切除;I/R+Na HS组暴露左肾动脉后行左肾动脉插管,将硫化氢供体Na HS以300nmol/min速度连续给药10 min,I/R组和Sham组左肾动脉给予注射等体积生理盐水。I/R组及I/R+Na HS组用微动脉夹夹闭左肾蒂45 min后解除夹闭,建立缺血性急性肾损伤模型,Sham组不给予夹闭。24 h后留取各组肾组织和血标本。通过蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Nrf2及其下游目标HO-1蛋白表达;用ROS荧光探针,DHE染色,通过荧光显微镜观察肾组织活性氧（ROS）表达;比色法检测肾组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量;TUNEL法检测肾组织细胞凋亡情况;HE染色法观察肾脏组织病理学改变;比色法检测血清肌酐（Scr）及尿素氮（BUN）浓度。结果:（1）H2S对I/R大鼠Nrf2及HO-1表达的影响与sham组相比,I/R组的肾小管上皮细胞内Nrf2和HO-1蛋白表达水平高（P（27）0.05）;与I/R组相比,I/R+Na HS组Nrf2和HO-1蛋白表达水平也明显增高（P＜0.05）,与I/R组相比有统计学意义。（2）H2S对I/R损伤大鼠ROS表达及MDA和SOD表达的影响与Sham组相比,I/R组ROS表达降低（P（27）0.01）,肾组织SOD活性下降、MDA含量升高（P（27）0.01）;与I/R组相比,I/R+Na HS组ROS表达升高（P（27）0.01）,肾组织SOD活性升高、MDA含量降低（P（27）0.01）,差异具有统计学意义。（3）H2S对I/R大鼠肾脏组织形态学及细胞凋亡的影响与Sham组相比,I/R组肾组织损伤加重（P（27）0.01）,凋亡细胞明显增多（P（27）0.05）;与I/R组相比,I/R+Na HS组肾组织损伤程度明显减轻（P（27）0.01）,凋亡细胞减少（P（27）0.05）,差异均具有统计学意义。（4）H2S对I/R损伤大鼠Scr和BUN表达的影响与Sham组相比,I/R组血清Scr及BUN含量升高（P（27）0.05）,与I/R组相比,I/R+Na HS组血清Scr及BUN降低（P（27）0.05）,差异具有统计学意义。结论:（1）H2S对大鼠肾缺血再灌注后肾功能有保护作用,可减轻肾脏氧化应激损伤。（2）Nrf2/HO-1信号通路参与大鼠肾脏缺血再灌注损伤。（3）H2S可通过上调Nrf2/HO-1信号通路,抑制氧化应激,在缺血性急性肾损伤起到保护作用。
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