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目的:了解急性髓系白血病M2a亚型(AML-M2a)患者外周血TCR Vβ亚家族克隆 性T细胞优势表达情况及体外诱导AML-M2a细胞特异性T细胞的细胞毒性 作用,以探讨获取一种治疗微小残留病变(MRD)的理想效应细胞的可能 性。方法:通过RT-PCR技术分析17例AML-M2a型患者外周血中TCR Vβ亚家族T细 胞的表达情况,并运用高敏感性的基因扫描技术分析优势表达的T细胞 TCR Vβ亚家族基因中CDR3长度从而了解其克隆性。用自体及异体混合淋 巴细胞培养技术(MLTC)和基因扫描技术进一步研究AML-M2a细胞体外诱 导自体及异体T细胞TCR Vβ亚家族的表达情况和克隆性特点,并以间接 荧光单抗标记技术和MTT方法分析克隆性T细胞的免疫表型和杀伤性。结果:与正常人外周血表达全部24个TCR Vβ亚家族T细胞不同,AML-M2a型 白血病患者外周血T细胞仅表达3-13个Vβ亚家族,并以Vβ13最多见, 其次为Vβ2和Vβ3;优势Vβ亚家族T细胞的表达存在个体差异性;部 分优势Vβ亚家族T细胞呈寡克隆性生长。在体外,AML-M2a细胞可以诱 导出与体内表达相似的优势Vβ亚家族T细胞;AML-M(2a)细胞诱导自体T 细胞和异体T细胞Vβ亚家族的选择性表达情况存在差异;部分优势Vβ 亚家族T细胞呈寡克隆性生长。通过对靶细胞AML-M2a细胞、HL60细胞 和K562细胞的细胞毒性分析结果表明,与自体LAK细胞相比,AML-M2a 细胞诱导的T细胞对诱导细胞AML-M2a细胞杀伤性强,特异性高。MLTC 获得的T细胞免疫表型以CD8+T细胞为主。结论:AML-M2a患者外周血选择性表达TCR Vβ亚家族克隆性T细胞,该表达与 AML-M2a相关抗原有关,后者可在体外诱导出自体和异体AML-M2a细胞特 异性CTL,该CTL可能为优势表达的Vβ亚家族克隆性T细胞。本实验为 治疗AML-M2a患者MRD提供制备一种效应细胞的可能性。