目的： (1)建立稳定转染CD147siRNA的恶性黑色素瘤(MalignantMelanoma，MM)A375细胞株； (2)了解在H2O2所致的氧化应激下，CD147siRNA转染对A375细胞存活率和凋亡状态的影响； (3)初步明确CD147分子保护A375细胞、减轻氧化损伤的机制。 方法： (1)将前期构建的重组质粒pSUPER/CD147siRNA稳定转染至A375细胞中，同时转染空白质粒作为对照，采用半定量RT-PCR法和Westem blot法检测转染细胞中CD147mRNA和蛋白的表达变化； (2)采用MTT法检测不同浓度H2O2对A375细胞的存活抑制率，并选择适宜的作用浓度； (3)采用MTT法检测CD147siRNA对A375细胞受氧化应激后细胞存活抑制率的影响； (4)采用光镜观察CD147siRNA对A375细胞受氧化应激后细胞形态学变化的影响； (5)采用试剂盒(JC-1染色法)检测CD147siRNA对A375细胞受氧化应激后细胞线粒体膜电位改变的影响； (6)采用流式细胞仪技术检测CD147siRNA对A375细胞受氧化应激后细胞凋亡指数(Apoptotie Index，AI)变化的影响； (7)采用试剂盒检测CD147siRNA对A375细胞受氧化应激后活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)、超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase，SOD)和丙二醛(malonyldialdehyde，MDA)水平变化的影响。 结果： (1)转染pSUPER/CD147siRNA后，A375细胞中CD147mRNA和蛋白的表达水平显著降低，二条针对CD147不同位点的siRNA的干扰效果分别为mRNA水平：77.96％(P<0.05)和73.39％(P<0.05)，蛋白水平：71.83％(P<0.05)和69.93％(P<0.05)，并将其建立为稳定转染的恶性黑色素瘤细胞株，分别命名为C1和C2，用于开展下一步的研究，转染pSUPER空白质粒的A375细胞中CD147mRNA和蛋白的表达水平无明显变化(P>0.05)，命名为A375-vector； (2)不同浓度H2O2处理A375细胞12h后，细胞存活抑制率呈浓度依赖性上升，计算得出IC50为463.1μM，选择300μM作为适宜浓度进行后续实验； (3)300μM H2O2作用各组细胞12h后，C1和C2细胞存活抑制率明显高于A375和A375-vector细胞，差异具有显著性(P<0.05)，A375和A375-vector细胞间比较无明显差异(P>0.05)； (4)300μM H2O2作用各组细胞24h后，细胞形态均发生了改变，C1和C2细胞形态变化较A375和A375-vector细胞更为明显，表现为细胞稀疏和明显的胞浆皱缩； (5)300μM H2O2作用各组细胞12h后，细胞凋亡率均较处理前上升，但C1和C2细胞凋亡率升高较A375和A375-vector细胞更为明显，差异具有显著性(P<0.05)，A375和A375-vector细胞间比较无明显差异(P>0.05)； (6)300μM H2O2作用各组细胞3h后，细胞线粒体膜电位均有降低，但C1和C2细胞线粒体膜电位降低较A375和A375-vector细胞更为明显，而A375和A375-vector细胞间比较无明显差异； (7)300μM H2O2作用各组细胞3h后，细胞内ROS水平均有增高，但C1和C2细胞中ROS水平升高明显高于A375和A375-vector细胞，差异具有显著性(P<0.05)，A375和A375-vector细胞间比较无明显差异(P>0.05)； (8)300μM H2O2作用各组细胞12h后，所有细胞细胞内T-SOD和Mn-SOD活性均降低，MDA水平均升高，但C1和C2细胞中T-SOD和Mn-SOD活性降低较A375和A375-vector细胞更为明显(P<0.05)，MDA水平升高亦较A375和A375-vector细胞更为明显(P<0.05)，A375和A375-vector细胞间比较无明显差异(P>0.05)。 结论： (1)建立了稳定转染pSUPER/CD147siRNA的A375恶性黑色素瘤细胞株； (2)在H2O2所致的氧化应激下，CD147siRNA可以进一步促进A375细胞存活率的下降、凋亡程度的上升； (3)在H2O2所致的氧化应激下，CD147siRNA可能通过加重细胞抗氧化系统的破坏和增加细胞内ROS水平的增高进一步加重A375细胞的氧化损伤。