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背景和目的目前，对化疗药物耐药仍然是卵巢癌治疗失败的主要原因。在顺铂联合紫杉醇的基础方案上添加新的二线化疗药物，耐药或复发患者的响应率只有不到30%。另外，随之增加的药物毒性反应及不良反应致使患者的耐受性和依从性均降低。由此，针对耐药基因的靶向治疗就凸显优势。由于近80%的卵巢癌患者存在p53基因的突变，所以大部分的基因治疗都聚焦于肿瘤抑癌基因p53。但是使用基因转导技术将野生型p53再次导入肿瘤细胞后，携带野生型p53的肿瘤细胞和突变型p53的肿瘤细胞哪个凋亡更明显，国内外的研究结果似乎并不一致，也有研究报道p53的基因治疗与细胞内p53的状态无关。近期有研究认为关于耐药的基因诊断有可能预测预后，但单独的分子靶向治疗或许不足以改善晚期卵巢癌患者的预后。本实验在不考虑p53状态的情况下，利用重组人p53腺病毒（rAd-p53）联合顺铂作用于人卵巢癌铂类耐药细胞系COC1/DDP，观察其对耐药细胞生长的影响。p73是p53家族成员之一，2个不同的启动子转录生成促凋亡的TAp73和抗凋亡的ΔTAp73亚型，不同亚型在细胞中的表达比决定了细胞生死命运。现已证实显性负性的ΔNp73亚型与肿瘤的化疗耐药密切相关，并能通过反馈回路抑制野生型p53和TAp73的促凋亡作用。本研究从基因水平使用荧光定量PCR技术检测了rAd-p53、顺铂及联合用药作用下p73的所有N端亚型表达情况，探讨各亚型在耐药人卵巢癌细胞凋亡中的作用。方法将人卵巢癌铂类耐药细胞COC1/DDP分成4组培养：对照组（不加药）；rAd-P53组（MOI400）；顺铂组（12ug/ml）；联合用药组(顺铂12ug/ml+rAd-p53400MOI)。MTT法测定不同浓度梯度下顺铂及rAd-p53对COC1/DDP细胞的A570值，比较不同处理组的细胞生长抑制率。流式细胞术检测各组细胞的凋亡率。使用荧光定量PCR技术半定量检测不同处理组p73所有N端亚型mRNA的相对表达量。结果（1）顺铂组、rAd-p53组、联合用药组24小时细胞抑制率分别是46.21±6.31%、13.48±2.49%、64.80±6.15%，差异有统计学意义（F=217.328，P=0.000），两两比较结果显示各组间的差异均有统计学意义（P＜0.05）。（2）联合用药组、顺铂组、rAd-p53组及对照组12小时细胞凋亡率分别为19.55±1.13%、14.96±1.80%、7.71±1.46%、6.23±0.98%，差异有统计学意义（F=61.688，P=0.000）。两两比较结果：联合用药组与单药组比较差异均有统计学意义（P＜0.05），而rAd-p53组与未加药组之间的差异无统计学意义（P＞0.05）。（3）荧光定量PCR结果：不同处理组中野生型p53的mRNA相对表达量均升高，但只有顺铂组和rAd-p53组与对照组间的差异有统计学意义（P＜0.05）。顺铂处理组中TAp73和Ex2/3p73的相对表达量升高（P＜0.05），而ΔNp73的表达下调（P＜0.05）。ΔN′p73和Ex2p73的表达上调，与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。rAd-p53组中5种亚型的相对表达量均升高。除了Ex2p73，其余4种亚型与未加药组间的差异均有统计学意义（P＜0.05）。联合用药组中ΔN′p73的相对表达量较对照组降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。其余4种亚型的相对表达量与未加药组比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论（1）重组人p53腺病毒对人卵巢癌铂类耐药细胞COC1/DDP的抑制作用有限，无促凋亡作用。（2）重组人p53腺病毒联合顺铂可增加人卵巢癌铂类耐药细胞COC1/DDP的敏感性。（3）重组人p53腺病毒的转染可增加人卵巢癌铂类耐药细胞COC1/DDP中TAp73和ΔNp73的mRNA表达。（4）TAp73/ΔTAp73的比值在人卵巢癌铂类耐药细胞COC1/DDP的凋亡中起主导作用。