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“桑黄”为担子菌亚门(Basidiomycotina),层菌纲(Hymenomycetes),多孔菌目(Polyporales),锈革孔菌科(Hymenochaetacae),针层孔菌属(Phellinus)的真菌,东亚的国家中已经被当作一种传统的药使用,用于治疗胃肠混乱,降火和淋巴的疾病。特别是它的抗肿瘤活性,桑黄也有许多优势作为抗癌候选药之一,被人们所关注。1.桑黄多糖的分离纯化及活性研究本部分,以桑黄Phellinus baumii为研究对象,从烘干菌丝体中通过水溶醇提法得到粗多糖,进一步经过DEAE-Sephadex A-50,以及Sephadex G-75柱层析得到一活性峰(PB),进一步研究发现,该多糖分子量约为17kDa。这是一种新的活性多糖。以PB为对象进行活性研究,体外活性检测发现,PB能有效刺激小鼠腹腔巨噬细胞、小鼠脾细胞以及小鼠巨噬细胞株RAW264.7增殖。进一步研究发现,PB能显著提高RAW264.7细胞NO的释放量,同时能显著增加IL-1β,IL-18,IL-6,IL-12p35和IL-12p40基因的表达水平,并且具有浓度依赖性。同时研究发现,PB对人肝癌细胞株HepG-2、人肠癌细胞株HCT-8细胞发挥直接的抑制作用,进一步研究发现,PB是通过阻断HepG-2细胞周期的S期来达到抑制生长的作用的,同时,在高浓度长时间作用下,PB还能诱导HepG-2细胞发生凋亡现象。因此,从桑黄Phellinus baumii菌丝体中提取的新的活性多糖(PB)同时具有广泛的免疫增强活性及直接的抑制肿瘤细胞增殖的活性。这些结果同时也说明,桑黄菌丝体多糖同样具有与子实体多糖相似的生物活性。而桑黄菌丝体生长周期短,产量高,因此,本部分为桑黄的进一步研究应用提供了新的途径。2.桑黄菌丝体乙醇粗提物活性的研究除了活性多糖外,桑黄还含有多种活性成分,如黄酮等。本部分,以桑黄烘干菌丝体为研究对象,通过乙醇提取法提取桑黄有效成分,对乙醇粗提物进行初步的研究。研究发现,桑黄菌丝体乙醇提取物含有少量的黄酮类物质。同时体外活性检测发现,该乙醇提取物能显著抑制HepG-2细胞的增殖。该乙醇粗提物处理HepG-2细胞后,其细胞形态出现明显的变化,细胞变圆、皱缩,体积变小；经过annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测,证明HepG-2细胞发生了凋亡；研究还发现,桑黄乙醇粗提物处理HepG-2细胞后,随着药物浓度和作用时间的增加,凋亡抑制基因BCL-2 mRNA的表达,逐渐减少；而凋亡促进基因BAX mRNA的表达随之增加；研究结果显示桑黄乙醇粗提物能够通过上调凋亡促进因子的表达,下调凋亡抑制因子的表达达到诱导HepG-2细胞凋亡的效果。