广谱胁迫蛋白编码基因(SIUSP1)介导番茄抗旱性的研究

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干旱是影响植物生长发育的主要非生物胁迫因子,是制约农业发展的主要因素之一。据统计,干旱给农业生产造成的损失几乎是其它自然灾害所造成损失的总和。面对日益频繁的自然灾害,传统的育种方法在耐旱性改良方面进展缓慢,现代生物学与生物技术的发展对植物耐旱机理的解析,已从生理生化及分子等水平进行了大量研究,并取得重要进展。植物主要通过改变气孔开度、形成发达根系;渗透调节物的形成、保护酶活性的提高、内源激素的调节、次生代谢物的合成等生理生化代谢都参与植物对干旱的防御;对植物耐旱的分子机理研究,近年已克隆了一大批耐旱相关基因,在植物抵御干旱过程中起直接保护或调控作用。干旱等逆境下,植物体内受ABA调控与非依赖ABA调控基因之间互作,形成复杂网络,共同调节多条信号途径转导和转录因子活性,激发下游基因表达,对干旱做出响应。番茄(Solanum lycopersicum)为世界性重要蔬菜之一,同时也是生物学模式生物之一。在我们以前的研究中,两个抗早渗入野生番茄种含有染色体片段(南pennellii),并确定了干旱应答大集基因,包括一个基因编码的普遍应激蛋白(USP)。在这项研究中,上述基因,指定S1USP1,克隆和功能特点。主要结果如下:1. SlUSP1从番茄基因组中克隆和测序,编码134个氨基酸的新型的普遍应激蛋白。2.候选基因的表达模式。通过qRT-PCR法,分析候选基因在番茄不同组织器官,以及在不同外界因子作用下的表达模式。结果表明,候选基因表达具有组织特异性,在成熟叶和茎中表达量都较高,而在根中不表达.在盐、高低温,Eth,干旱及ABA候选基因被诱导.3.候选基因的转基因创建。构建候选基因超量表达载体,利用农杆菌介导的遗传转化方法,将候选基因转入番茄栽培种中蔬6号中。通过PCR法检测,获得超量表达阳性植株4.转基因植株苗期抗旱性检测试验表明,转基因番茄幼苗在三叶一心期对干旱的’耐受性明显高于对照。连续3次干旱胁迫处理后,转基因植株能继续长同时对照死了。5.利用酵母双杂交系统发现SlUSP1和不同干旱相关基因互作蛋白的初步研究.
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