碳水化合物识别结构域（CRD）是凝集素与糖配体结合的结构基础,不同种类的凝集素所具有的不同CRD决定了其对糖残基的选择性识别。人巨噬细胞半乳糖型凝集素（hMGL）是C-型凝集素家族（CLRs）的重要成员之一,通过与不同的配体分子结合,引起免疫激活或免疫耐受。现在已知,hMGL可以特异性地识别其糖配体分子末端的GalNAc,但对于其CRD中参与同GalNAc识别的关键氨基酸并不清楚。在本研究中,我们采用了生物膜干涉和流式细胞术两种实验方法,从蛋白和细胞两个水平分析了hMGL CRD的4种截短突变和17种单点突变对其与Gal NAc识别的影响,对hMGL与GalNAc结合的结构基础进行了初步解析。实验结果表明,Gln240、Asp242、Glu253、Asn265和Asp266对于hMGL与GalNAc的结合具有非常重要的作用。氨基酸序列比对和空间结构模拟分析表明,以上5个氨基酸不仅是hMGL CRD中的Ca²⁺结合位点,而且也参与了其与GalNAc的特异性识别。其次,证实了His257、Asp225、Thr227和Asp228对hMGL与GalNAc的结合也具有重要作用。氨基酸序列比对和空间结构模拟分析表明,以上4个氨基酸可能不是直接参与同GalNAc的结合,而是通过贡献于Ca²⁺结合位点空间结构的形成发挥重要作用。参与hMGL与GalNAc特异性结合的关键氨基酸位点的鉴定研究,不仅有助于揭示hMGL与其配体识别的结构基础,而且也为今后进一步研究不同的凝集素对糖分子的选择性识别机制提供重要的前期基础。