蛋类农产品中兽药残留检测技术优化与应用研究

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蛋类农产品是我国居民膳食结构中主要的蛋白质来源,在日常饮食中占有很大的比例,因此对蛋类农产品中的兽药残留检测是保障居民日常饮食安全中的重要环节。鉴于蛋类农产品在人们膳食结构中占有不可或缺的重要地位,为了加快了养殖业的快速发展,同时为保障养殖业健康的发展,兽药被广泛应用。蛋类农产品中的兽药残留问题也引起了全国乃至世界的广泛关注,但由于蛋类农产品中残留的兽药种类不同,目前相关国家标准主要是采取不同的检测方法对兽药残留进行分类检测,存在检测周期长、检测成本高、检测效率低等缺点。本研究拟对蛋类农产品中兽药残留检测技术进行优化,建立高效液相色谱-串联质谱法同时测定多种兽药残留的方法。本研究以鸡蛋为主要研究对象,建立了一种高速、高效且能够同时检测蛋类农产品中常见的喹诺酮类、磺胺类、硝基咪唑类、金刚烷胺类、氯霉素类五类共30种兽药残留的检测定量方法,并通过在100批次蛋类农产品中进行检测分析,评估方法在实际检测中的可行性;同时还评估了该方法的可扩展性。结果如下:(1)本研究通过对仪器参数的优化,确定了30种兽药残留和内标物的最佳质谱检测条件和离子参数,以1%甲酸为水相,乙腈为有机相按照洗脱程序运行13 min后对待测液进行测定;确立了喹诺酮类、氯霉素类和金刚烷胺类兽药残留采用同位素内标法定量方式,硝基咪唑类和磺胺类兽药残留采用外标法的定量方式;(2)本研究通过对提取方法的优化,考察了提取溶剂、提取方式、提取次数和净化方式对目标物回收率的影响,确定了本研究的最佳提取方案为:用无水硫酸钠去除鸡蛋中的水分作为前处理;采用均质提取方式进行两次提取,第一次提取溶剂为3 m L0.1 mol/L EDTA-2Na水溶液和7 m L乙腈,第二次提取溶剂为3 m L乙酸乙酯和7 m L乙腈,合并两次提取物,氮吹浓缩后用1%甲酸水溶液复原至5 m L;净化方式选择C18+PSA粉末和正己烷净化,再过固相萃取柱,收集洗脱液,氮吹至近干,用1 m L 1%甲酸水溶液定容,0.2μm滤膜过滤;(3)本研究通过对建立的检测方法进行方法验证,在1~20 ng/m L或5~100ng/m L的线性范围内,30种兽药残留线性关系良好,且相关系数R均大于0.998。精密度的考察中30种兽药残留相对标准偏差为0.63%~11.11%。加标回收率为62.9%~119.3%,相对标准偏差为0.26%~9.46%。方法检出限范围为0.09μg/kg~0.96μg/kg。同时,测定质控样品,检验结果均在特性值区间范围内;(4)本研究应用于实际检测分析,在100批次样品中,有4批次样品检出30种兽药残留中的某种药物;但有2批次检出甲硝唑含量按照相关国家标准检测低于其检出限,本次检测结果则作为风险提示;另外2批次检测结果与相关国家标准检测结果相对误差低于5%,为不合格样品;(5)同时还探索了本研究方法的可扩展性,应用于猪肉和水产品中,检出兽药种类为恩诺沙星和磺胺类,猪肉检出率为20%,水产品检出率为30%。与相关国家标准标准测定结果对比相对误差均在15%范围内,其中水产品不合格率为10%。说明本研究方法也适用于猪肉和水产品基质样品中30种兽药残留的检测。综上可以看出,本研究建立的同时检测五类共30种兽药残留的方法适用于蛋类农产品、猪肉、水产品的检测定量分析,具有高速、高效和同时检测的优点;可为日常的农产品风险监测提供依据,为国家监督抽检蛋类农产品提供技术支撑。同时还可帮助消费者正确理解兽药残留的风险,消除不必要的恐慌,科学引导消费者购买行为以及规范企业的生产经营活动。
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