樟脑对马铃薯发芽过程中生理影响和蛋白质组研究

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马铃薯是世界主要作物之一,但每年因马铃薯马铃薯贮藏不当,造成巨大的经济损失。本实验使用樟脑,发现对马铃薯块茎发芽有明显的抑制作用,并测定生理指标,研究樟脑对块茎品质影响。基于iTRAQ技术得到差异蛋白,并使用qRT-PCR技术对差异蛋白结果进行验证。主要研究结果如下:(1)樟脑处理后对蓉芋紫、大西洋、费乌瑞它和丽薯1号四个品种马铃薯均产生明显抑芽作用,相较于对照组,芽点少,芽长短,部分芽点坏死。对照组、樟脑处理、抑芽处理及恢复处理的费乌瑞它和丽薯1号品种马铃薯种植,测量株高、叶绿素含量,各处理均无显著差异。此外,各处理马铃薯产量、块茎还原糖及总糖含量、可溶性蛋白含量也无显著差异,说明马铃薯块茎品质并未受樟脑影响。(2)费乌瑞它品种马铃薯休眠期(M1)、发芽期(M2)和樟脑处理的块茎样品(M3)进行iTRAQ蛋白质组定量分析,M1/M2处理间,共有213个差异蛋白;M1/M3处理间,共有416个差异蛋白;M2/M3处理间,共有315个差异蛋白。(3)GO注释对差异蛋白分析,可以将差异蛋白分为细胞组成、分子功能及生物过程。通过GO二级分类对差异蛋白分析。M1/M2中涉及3种细胞组成、6种分子功能及6种生物过程。M1/M3中涉及到7种细胞组成、7种分子功能及8种生物过程。M2/M3中涉及到4种细胞组成、6种分子功能以及7种生物过程。(4)差异蛋白亚细胞定位分析,在M1/M2、M1/M3和M2/M3中主要分别定位在细胞质、叶绿体和细胞核中。GO富集分析,M1/M2差异蛋白显著富集在“翻译”等功能term中;M1/M3差异蛋白显著富集在“生物过程调节”等功能term中。M2/M3差异蛋白显著富集在“生物应激应答”等功能term中。KEGG Pathway富集分析,M1/M2、M1/M3和M2/M3差异蛋白均富集在“核糖体”代谢途径。(5)qRT-PCR验证随机挑选的15个差异蛋白,其中,基因表达和iTRAQ表达水平一致共13个,表达水平相反共2个。
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