硒缺乏对鸡肝脏内源性硫化氢及其相关生成酶的影响

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:stefanie456
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硒是人和动物体内一种重要的微量元素。日粮中硒缺乏会引发一系列疾病。肝脏是鸡硒缺乏时的一个靶器官。硫化氢(H2S)是近年来发现的继NO和CO后的第三类气体信号分子,参与了机体许多系统的生理活动。有研究表明内源性H2S具有保护肝脏及调节肝脏一些生理功能的作用。H2S在体内主要通过胱硫醚γ裂解酶(Cystathionine γ-lyase, CSE)、胱硫醚p合酶(Cystathionine β-synthase, CBS)和3-巯基丙酮酸硫转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,3-MST)来合成。当发生疾病时,机体内源性H2S的含量以及相关酶的基因表达量会发生改变。但硒缺乏与内源性H2S的关系尚不清楚。本实验以鸡为试验动物,通过低硒日粮喂养鸡15、25、35、45、55、65d来建立模型,即对照组饲喂全价饲料,饲料硒含量为0.15mg/Kg低硒组饲喂低硒日粮,饲料硒含量为0.033mg/Kg。应用基因克隆技术在原核表达系统中表达了CSE并制备了多克隆抗体。研究了饲喂低硒日粮对鸡组织中H2S的含量以及促进H2S生成的相关基因(CSE、CBS、3-MST)表达的影响。研究结果表明:1.通过原核表达技术成功制备了CSE融合蛋白。用CSE融合蛋白免疫新西兰白兔,共免疫4次,用间接酶联免疫吸附测定法测定血清效价,兔抗鸡CSE多克隆抗体的效价为1:25600。2.饲喂低硒日粮可导致鸡肝脏中H2S含量显著性升高(P<0.05)。3.饲喂低硒日粮可以使促进H2S生成的相关酶(CSE、CBS、3-MST)mRNA表达量以及CSE蛋白表达量升高。综上所述,日常饲料中硒缺乏可导致鸡肝组织中H2S含量增加,CSE、CBS、3-MST的mRNA表达量及CSE蛋白表达量升高,表明硒缺乏引起机体的损伤与H2S及其生成酶存在一定的关联,机理可能是由于机体自发调控来保护肝脏,本研究为硒缺乏与内源性H2S关系的进一步探索提供了一定的理论基础。
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