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目的:了解HBsAg阴性的维持性血液透析患者中隐匿性HBV感染的检出率,探讨其与研究对象性别、年龄、HBV血清标志物、抗-HCV、透析时间等的相关性。同时随机选取HBsAg阳性血透患者作为对照,从S基因变异角度探讨隐匿性HBV感染可能的分子机制。方法:①病例选择和标本收集:102份HBsAg阴性的维持性血液透析患者血清标本均来自2009年12月至2010年4月在安徽省合肥市数家三甲医院的血液净化中心长期透析患者。另从上述血透中心中随机选取7例HBsAg阳性的维持性血透患者作为对照。②雅培Architect I 2000R电化学发光仪定量检测HBV血清学标志物。③HBV DNA提取:采用经典蛋白酶K消化-酚/氯仿法。④巢式PCR法检测HBV DNA:参考国内外文献及HBV参照序列,在HBV基因组S、C、X区分别设计一对巢式引物。巢式PCR扩增,当任两个区同时阳性者定义为隐匿性HBV感染者。对隐匿性HBV感染者与非感染者进行性别、年龄、HBV血清标志物、抗-HCV、透析时间等的比较。⑤扩增HBV DNA阳性者小S区测序:根据HBV参照序列,在S区设计引物,对隐匿性HBV感染者以及7例HBsAg阳性的血透患者进行扩增测序,并进行基因型、HBsAg“α”决定簇突变分析,发现可能和HBV隐匿性感染有关的变异位点。结果:①102份经ELISA法初筛的HBsAg阴性血清经ECLIA法证实HBsAg均为阴性,巢式PCR检测出2个区同时阳性者有8例(包括3个区同时阳性者),即共检测到8例隐匿性HBV感染者,即HBsAg阴性的血透患者中隐匿性HBV感染的检出率约为7.8%。②将8例隐匿性HBV感染者作为实验组,94例HBsAg阴性、HBV DNA阴性者作为对照组。实验组的年龄、性别分布、透析时间等与对照组相比,差别无统计学意义。在抗-HCV阳性与阴性的血透患者中,隐匿性HBV感染的检出率分别为16.7%和6.7%,差异亦无统计学意义。除了单一抗-HBc阳性外,各种HBV感染的血清学模式在实验组与对照组中都无明显差异。在单一抗-HBc阳性的血透患者中隐匿性HBV感染的检出率(30.8%,4/13)显著高于非单一抗-HBc阳性的血透患者隐匿性HBV感染的检出率(4.5%,4/89)(χ~2 = 7.504, P﹤0.01),即在血透患者中隐匿性HBV感染更常发生于单一抗-HBc阳性者。③成功扩增测序的6例隐匿性HBV感染者病毒株中2例为B基因型,4例为C型,7例HBsAg阳性的维持性血透患者均为B基因型。分别对两组患者进行S区核苷酸和氨基酸的同源性分析,结果显示隐匿性HBV感染者S区的核苷酸替换率为0.15%-4.26%,氨基酸替换率为0.44%-9.73%,而阳性对照的核苷酸替换率为0.73%-1.17%,氨基酸替换率为1.77%-2.65%。④6例隐匿性HBV感染者中共有3例在HBsAg“α”决定簇出现了氨基酸突变,2例联合突变均发生在基因C型病毒株中,分别为Q129P/T131N/S143T/G145S,Q129P/T131N/D144V/G145S;而7例基因B型的HBsAg阳性血液透析患者“α”决定簇区域内未见突变。结论:①在本地区HBsAg阴性的维持性血液透析患者中隐匿性HBV感染的检出率约为7.8%,在单一抗-HBc阳性的研究对象中隐匿性HBV感染的检出率较高(30.8%)。②维持性血液透析患者中隐匿性HBV感染的存在与抗-HCV阳性与否并无相关性,而与单项抗-HBc的阳性率显著相关。对血透人群进行隐匿性HBV感染的检测,尤其对于单一抗-HBc阳性者具有十分重要的临床意义。③HBV S区基因变异尤其是HBsAg“α”决定簇的氨基酸改变可能是血透患者HBV隐匿性感染的分子基础。