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酒石酸锑钾(PAT)在我国水产养殖中曾用于寄生虫疾病的防治。由于其代谢产物-锑具有很强的毒性,农业部193号公告以及235号公告已将其归为禁用渔药之列。但由于缺乏检测标准,不能排除部分渔民会继续使用,并且锑毒性大、难代谢,对水产品质量安全有极大威胁。PAT进入生物体后立即分解为锑、酒石酸、以及钾离子。由于钾离子在生物体中属于常量元素,不能作为检测酒石酸锑钾残留指标,而酒石酸和锑在水产品本底中含量低,是酒石酸锑钾的特征代谢产物,因此,本文以检测二者残留判定是否使用过PAT。同时,由于PAT中的三价锑进入水产品后形态会发生变化,且毒性发生变化,因此有必要建立水产品中不同锑形态分析检测方法。本文通过研究建立了水产品中总锑、无机锑、无机锑中的三价锑、无机锑中的Sb(Ⅴ)以及酒石酸的检测方法;同时,对鲫鱼进行PAT药浴试验,分析了鲫鱼各组织中总锑、不同形态锑、酒石酸的含量变化,揭示了鲫鱼体内PAT富集代谢规律以及锑形态和价态转化规律,并对水产品中PAT残留检测提出了参考意见。论文研究内容主要有以下几方面: 1.建立了水产品中PAT代谢产物-锑的顺序注射-氢化物发生原子荧光(HG-AFS)检测方法。首先利用微波消解,湿法消解,微波消解结合湿法消解的前处理方法展开对水产品中总锑测定研究,同时对石墨炉-HRCS AAS、氢火焰-HRCS AAS以及顺序注射-HG-AFS三种检测技术测定总锑进行了比较,选择了微波消解结合湿法消解顺序注射-HG-AFS法检测水产品中PAT代谢产物-总锑。在该方法下,锑检测限为0.027ng/mL。空白基质加标水平0.125mg/Kg、0.500mg/Kg下的平均回收率为95.97~102.09%,RSD<6%。 2.建立了顺序注射-HG-AFS检测水产品中无机锑及其价态的方法。样品经4mol/L盐酸溶液超声浸提后加入一定量掩蔽剂、还原剂以及消泡剂在既定HG-AFS条件下测定无机锑含量。另一份相同样品中加入混合溶液(0.5mol/L硫酸混合0.5mol/L盐酸混合0.1% NaF)浸提后加入一定量掩蔽剂及消泡剂并调节样液盐酸浓度,在既定HG-AFS条件下测定Sb(Ⅲ)含量。无机锑含量减去Sb(Ⅲ)含量为Sb(Ⅴ)含量。在该方法下无机锑在0.5~40 ng/mL浓度范围内线性良好,线性相关系数为0.9991。以3SD/k计算,检出限为0.450μg/kg。6次平行测定RSD为2.31%,基质加标回收率为90.97~100.10%。Sb(Ⅲ)在0.5~40ng/mL浓度范围内线性良好,线性相关系数为0.9996,以3SD/k计算,检出限为0.400μg/kg,6次平行测定RSD为3.51%,基质加标回收率范围为84.54-89.05%。 3.建立了固相萃取-抑制电导离子色谱法测定水产品中PAT代谢产物-酒石酸的方法。在该方法下,酒石酸在80.00~1000.00ng/mL线性范围内的线性相关系数为0.9989。以3倍信噪比计算得酒石酸检出限为50μg/L,基质加标回收率介于84.39%~87.23%,RSD<6.53%。 4.研究了PAT在鲫鱼中的代谢规律以及锑形态变化规律。首先通过预实验确定PAT检测和代谢规律研究应以锑为指标;然后分析了两种PAT药浴剂量药浴24h过程中,鲫鱼各组织中总锑、无机锑、Sb(Ⅲ)以及Sb(Ⅴ)的分布和含量变化。结果表明:PAT中Sb(Ⅲ)进入机体后主要以无机锑形式存在,无机锑主要以Sb(Ⅲ)存在,肝脏是锑主要的靶器官;锑在鲫鱼中分布为肝胰腺>鳃>血液>肌肉;Sb(Ⅲ)主要在肝脏和血液中转化为Sb(Ⅴ);鲫鱼各个组织中锑的富集量对PAT药浴染毒剂量几乎不呈现剂量-反应关系,且各组织对锑的富集存在饱和现象。在80mg/L酒石酸锑钾药浴后的120d代谢过程中,鲫鱼各组织中的锑残留量及其变化表明:鲫鱼四个组织中总锑呈现下降的趋势,并且前8d代谢相对较快,8d后代谢相对较慢;四个组织对锑的代谢速度不相同,按其速率大小为肝胰腺>鳃>血液>肌肉,可见对锑富集力度越大的组织,其锑代谢速度也越快。代谢120d后,鳃、血液、肌肉中总锑残留量与背景值相差不大,但肝胰腺中总锑残留量仍为背景值的8倍左右,说明锑在肝胰腺中代谢时间较长。前40d代谢过程中,四个组织中锑主要以无机锑的形式存在,但是无机锑占总锑比例有不同程度的下降,说明部分无机锑转化为了其他形态锑;在肝脏中,随着代谢时间的延长,Sb(Ⅴ)占无机锑比例明显逐渐升高,说明在代谢过程中Sb(Ⅲ)转化为Sb(Ⅴ)的主要场所可能主要是肝脏。在富集和代谢过程中,鲫鱼各组织中不同形态锑的时间-浓度曲线都呈现出了双峰和多峰现象,说明鲫鱼对锑的富集和代谢动力学较为复杂。