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目的:支气管哮喘(简称哮喘),是由多种细胞(如嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等)和细胞成分参与的气道慢性炎症疾病。现代医学已经证实气道慢性炎症是引起哮喘的基本病理改变和最主要发病机制。因此,抗炎治疗已是哮喘病的首要治疗原则。尽管西医以慢性期抗炎为主的治疗取得了巨大的成功,但近20年来的流行病学调查并没有发现哮喘发病率和死亡率有所降低。因此,对哮喘病发病机理的深入研究和寻找有效的治疗方法具有非常重要的意义。中医药治疗哮喘具有自身的优势,传统的中药复方具有多靶点、多环节的作用特点,能影响哮喘病的诸多病理过程从而起到治疗作用。加味麻杏石甘汤(MG)是导师在古方麻杏石甘汤的基础上加味而成的经验方。该方在临床中能有效控制小儿哮喘病发作期症状,对缓解期治疗也起到一定的作用,具有一定的临床基础。本课题通过实验研究观察MG对哮喘大鼠气道炎症及Th1/Th2失衡的影响,探讨MG抗气道炎症的作用机理,为MG治疗小儿哮喘的临床应用提供实验依据。方法:将60只SD雄性大鼠随机分为6组:正常对照组、哮喘模型组、MG小剂量组、MG大剂量组、地塞米松组、MG地塞米松联合组,每组10只。除正常对照组外,其余5组于第1天、第5天和第8天分3次腹腔注射抗原液1ml(含卵蛋白100mg,灭活百日咳杆菌疫苗5×109个和氢氧化铝干粉100mg)致敏,正常对照组用等量的生理盐水进行致敏。第14天开始将大鼠放入自制的不完全封闭的有机玻璃箱内,予1%卵蛋白(OVA)溶液用超声雾化器喷雾激发,每天1次,每次20分钟,连续定时,共激发12天。正常对照组用等量的生理盐水进行激发。第17天开始给药,每次雾化吸入激发前半小时给予药物干预, MG小剂量组给予灌胃MG 21.2g /kg/d, MG大剂量组给予灌胃MG42.4g/kg/d ,地塞米松组给予灌胃地塞米松0.75 mg/kg/d,MG地塞米松联合组给予灌胃地塞米松0.375 mg /kg/d和MG 21.2g /kg/d,正常对照组和哮喘模型组灌胃等量生理盐水,均每天1次,共8天。第25天,末次激发结束后12小时内,各组大鼠均以12%的乌拉坦腹腔注射麻醉后分离腹主动脉取血备用。取血后处死动物,分离气管,结扎右肺,左肺用2ml生理盐水(37℃)经气管插管注入肺内,作来回抽洗两次(不停留),收取支气管肺泡灌洗液(BALF)。采用常规计数法检测外周血嗜酸性粒细胞(EOS)计数和ELISA法测定血清和BALF中IFN-γ、IL-4等指标的变化情况。结果1 MG对哮喘大鼠气道炎症的影响模型组外周血EOS数、BALF中白细胞总数和EOS分类计数均升高,与正常组相比均有显著差异(P <0.001)。MG、地塞米松和联合用药均能减少OVA致敏哮喘大鼠外周血EOS数,与模型组相比,MG大剂量组、地塞米松组和联合用药组均有显著差异(P<0.01),MG小剂量组有显著差异(P<0.05)。MG、地塞米松和联合用药均能降低大鼠BALF中白细胞总数,与模型组相比,MG大剂量组、地塞米松组和联合用药组均有显著差异(P<0.01),MG小剂量组无显著差异(P>0.05)。MG、地塞米松和联合用药均能降低大鼠BALF中EOS分类计数,与模型组相比,MG大剂量组、地塞米松组和联合用药组均有显著性差异(P<0.001),MG小剂量组有显著性差异(P <0.01)。2 MG对哮喘大鼠血清及BALF中IFN-γ浓度的影响模型组血清及BALF中IFN-γ的浓度明显降低,与正常组相比有显著差异(P <0.001);经药物治疗后,各组大鼠血清及BALF中IFN-γ的浓度均升高,与模型组相比均有显著差异(P <0.01);MG大剂量组血清及BALF中IFN-γ的浓度较小剂量组呈显著性增高(P<0.05);MG大剂量组、地塞米松组和联合用药组血清及BALF中IFN-γ的浓度无显著性差异(P >0.05)。3 MG对哮喘大鼠血清及BALF中IL-4浓度的影响模型组血清及BALF中IL-4的浓度明显升高,与正常组相比有显著差异(P<0.01);经药物治疗后,各组大鼠血清及BALF中IL-4的浓度均降低,与模型组相比均有显著差异(P <0.001);MG大剂量组血清及BALF中IL-4的浓度较小剂量组呈显著性降低(P<0.05);MG大剂量组、地塞米松组和联合用药组血清及BALF中IL-4的浓度无显著性差异(P >0.05)。4 MG对哮喘大鼠血清及BALF中IFN-γ/IL-4比值的影响模型组血清及BALF中IFN-γ/IL-4比值明显降低,与正常组相比有显著差异(P<0.001);经药物治疗后,MG大剂量组、地塞米松组和联合用药组血清及BALF中IFN-γ/IL-4比值均升高,与模型组相比均有显著差异(P <0.001);MG大剂量组血清及BALF中IFN-γ/IL-4比值较小剂量组呈显著性升高(P<0.05);MG大剂量组、地塞米松组和联合用药组血清及BALF中IFN-γ/IL-4比值无显著性差异(P >0.05)。结论:MG能有效改善哮喘大鼠的气道炎症状况,能升高哮喘大鼠外周血清及BALF中Th1类细胞因子IFN-γ水平,降低Th2类细胞因子IL-4水平,升高IFN-γ/IL-4比值,调节Th1/Th2的失衡,从而起到抗气道炎症和免疫调节的作用。