红树林活性真菌的筛选及两株内生真菌次级代谢产物的研究

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红树林特殊的生态环境,蕴育了红树林微生物独特的遗传背景和代谢途径,其代谢产物具有结构类型丰富多样,骨架复杂新奇,生物活性多样等特点。对红树林微生物活性物质的研究已发展成为开发海洋微生物资源,寻找天然药物先导化合物的重要途径。本论文的研究主要是对50株采集于广东阳江红光村红树林保护区内的药用根际土壤真菌和内生真菌资源进行了初步的抑菌活性筛选,以及对有较好的抑菌活性的真菌进行次级代谢产物的研究。从采集到的药用红树植物桐花、秋茄、白莲、木榄、老鼠簕的根、茎、叶和树皮,及植物根际15~20cm处的土壤样品中,共分离得到真菌50株;通过以大肠杆菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)、藤黄微球菌(Micrococcus luteus)、沙门氏菌(Salmonella)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、白葡萄球菌(White staphylococcus)为指示菌,对菌株进行了抑菌活性筛选,以其乙酸乙酯粗提物的最低抑菌浓度MIC值和最小杀菌浓度MBC值为参考,筛选得到16株抑菌活性较好的菌株;在此基础上,利用薄层色谱TLC对真菌次级代谢产物及结构类型的初步分析,放大培养了菌株HN7-3D和菌株HN6-3B,并对其次级代谢产物进行了分离纯化。本论文在抑菌活性指导下,通过硅胶柱层析、ODS等色谱分离方法,对菌株HN7-3D进行次级代谢产物的分离研究,得到3个对应成分的化合物。对菌株HN6-3B进行分离纯化得到7个化合物鉴定为1,3,8-trihydroxyanthracene-9,10-dione(4-1),1,3,8-trihydroxy-6-methylanthracene-9,10-dione(4-2),1,3,8-trihydroxy-6-(2-hydroxypropyl)anthracene-9,10-dione(4-3),1,8-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)anthracene-9,10-dione(4-4),4-methoxy phenol (4-5),(4-methoxyphenyl)methanol(4-6),麦角甾醇(4-7)。
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