ATRA对卵巢上皮性癌Wnt/β-catenin通路的作用

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第一部分:Wnt信号通路成分β-catenin、cyclinD1、c-myc在卵巢浆液性腺癌中的表达及其临床意义目的检测Wnt信号通路相关分子β-连环蛋白(p-catenin)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、c-myc在卵巢浆液性腺癌中的表达情况,探讨它们与卵巢浆液性腺癌的FIGO分期、病理分级、患者预后之间是否存在一定的联系,同时分析β-catenin与cyclinD1、β-catenin与c-myc之间是否存在相关性。方法应用免疫组织化学Power Vision (PV)二步法检测该60例卵巢浆液性腺癌中β-catenin、cyclinD1、c-myc的表达。结果(1)β-catenin的表达与FIGO分期相关,Ⅲ、Ⅳ期组的阳性表达高于I、II期组(P=0.003);与病理分级无关(P=0.817);与患者预后相关,β-catenin阳性组的生存率低于阴性组(P=0.034),晚期(Ⅲ、Ⅳ期)患者中β-catenin与预后无关(P=0.495)。(2)cyclinD1的表达与FIGO分期无关(P=-0.829);与病理分级相关,高级别组的阳性表达高于低级别组(P=-0.017);与患者预后相关,cyclinD1阳性组的生存率低于阴性组(P=0.009),晚期(Ⅲ、Ⅳ期)患者中cyclinD1与预后相关(P=0.039)。(3)c-myc的表达与FIGO分期无关(P=0.069);与病理分级相关,高级别组的阳性表达高于低级别组(P=0.016);与所有期别患者、晚期患者的预后均无关(P=0.266, P=0.788)。(4) cyclinD1与β-catenin、β-catenin与c-myc的表达呈正相关(P=0.014,P=0.005)。结论Wnt信号通路成分β-catenin、cyclinD1、c-myc可能在卵巢浆液性腺癌的发生发展中发挥了作用,两者高表达提示预后不良,检测其表达情况有望指导临床工作。第二部分:全反式维甲酸对人卵巢癌细胞株COC2中β-catenin表达的影响目的Wnt/β-catenin信号通路的激活可以导致多种肿瘤包括卵巢癌的发生发展,Wnt/β-catenin通路信号传导的关键步骤是细胞质中β-catenin积聚并进入细胞核促进相关基因转录,而β-catenin是Wnt/β-catenin信号通路的关键分子,本实验检测ATRA干预前后人卵巢上皮性癌细胞株COC2中β-catenin的表达情况,探讨ATRA对β-catenin的作用,进而了解ATRA抗卵巢上皮性癌增殖的可能机制。方法将卵巢上皮性癌细胞株COC2培养至105个/ml浓度时加ATRA干预,将培养的细胞分为对照组和ATRA干预组,干预组再分为三小组,分别给予1、5、10μmol/L的ATRA,置于同条件下培养,提取各组COC2细胞中的总RNA,利用RT-PCR方法检测四组细胞中β-catenin mRNA的表达,再次培养细胞并加ATRA干预,提取细胞总蛋白,利用蛋白免疫印迹(Western blotting)的方法检测四组细胞株β-catenin蛋白的表达水平。结果1、5、10μmol/L ATRA干预组的β-catenin mRNA及蛋白的表达水平相比对照组均有所降低,并呈现ATRA浓度依赖性。结论ATRA作用于COC2卵巢上皮性癌细胞株后可降低细胞中P-catenin的表达,进而抑制细胞增殖,达到抗卵巢上皮性癌的作用,Wnt/β-catenin信号通路可能是ATRA抗卵巢上皮性癌的机制之一。
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