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生防木霉菌T23在保护地土壤瓜类枯萎病的防治上效果不够理想,本文在室内人工控制条件下研究保护地土壤主要化学因子对T23生长及定殖的影响,并从DNA水平分析化学因子对T23诱导后DNA多态性变化。
多菌灵、甲基托布津、福美双、代森锰锌、百菌清、五氯硝基苯六种常用杀菌剂对木霉菌菌丝生长及根表定殖有明显影响,研究结果表明,即使低浓度的多菌灵对木霉菌的生长和定殖也有较强的抑制作用。多菌灵对木霉菌的生长和定殖抑制作用最强,其次为甲基托布津和百菌清,然后是五氯硝基苯,而福美双和代森锰锌对木霉菌的生长和定殖抑制作用最小。含5μg/mL的多菌灵PDA上T23不产生孢子;50μg/mL的甲基托布津和100μg/mL的百菌清PDA上T23受到严重抑制。
在自然土及无菌土内从不同浓度N、P、K肥应用水平下的甜瓜根际分离的生防木霉菌T23,结果表明,尿素和过磷酸钙对T23的菌丝生长,产孢及定殖有抑制作用,尿素表现较明显,含100μg/mL尿素PDA对T23菌丝生长和产孢有抑制作用,而硫酸钾对木霉菌T23的定殖有促进作用。含1000μg/mL的硫酸钾PDA就有此表现。
微量元素影响木霉菌生长和在甜瓜根表的定殖。木霉菌在含有微量元素的培养基上生长状态与不加入微量元素的对照相比没有明显差别。
木霉菌T23经过六种杀菌剂反复诱导处理,继代培养8代后生物学特性发生了变化,研究发现诱变体利用温度,光照,pH值,营养元素等所需生长条件发生了变化。多菌灵的诱导产物菌丝生长速度慢,产孢量少;代森锰锌诱导产物菌丝生长速度快,产孢能力强;各诱变体耐高温,耐碱性能力增强。TRA长势弱于T23,TRD长势强于T23,TRE在黑暗条件下生长较好,TRB在pH值等于8时产孢量高于T23。微量元素镁能促进TRD菌丝生长,微量元素锌能刺激TRD产生孢子。
继代培养T23第5代时,各菌株外观培养性状呈现不同,继代培养T23第8代后,各菌株培养形态和颜色与T23相比明显不同,各诱变体在PD培养液中与T23生长性状相比存在差异,同时第8代诱变体和尖孢镰刀菌对峙培养,各诱变体的重寄生能力有所下降。
通过随机扩增多态性检测结果表明:引物S33、S68、S147扩增出来的谱带有许多菌株基本相同,说明供试菌株亲缘关系很近,菌株TR06、TR11、TR08(多菌灵、甲基托布津、百菌清第8代诱变体)TR14和TR21(尿素和过磷酸钙第8代诱变体)与原始菌株T23亲缘关系较远,可能存在遗传变异。