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目的:观察金黄扶正散对免疫抑制小鼠的非特异性免疫、细胞免疫和抗应激、抗氧化调节作用,评价金黄扶正散的免疫调节活性,探讨其免疫调节作用的机制,为其临床应用提供依据。 方法:(1)建立免疫抑制小鼠模型,清洁级昆明种小鼠60只,13~15g,随机分为六组。各组每天灌胃给药,连续给药10d,同时,除正常对照组外,其余各组隔天皮下注射(Sc)环磷酰胺(Cy)30mg/kg的方法制造免疫功能低下小鼠模型。灌胃给药10d后,分别摘取胸腺、脾脏、血液等测定脏器指数,血常规,小鼠脾脏细胞中乳酸脱氢酶(LDH)和酸性磷酸酶(ACP)的活性及血清中细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)的水平。(2)灌胃给药10 d后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定刀豆蛋白A(ConA)诱导脾脏T淋巴细胞增殖和脂多糖(LPS)诱导B淋巴细胞增殖的影响及自然杀伤细胞(NK细胞)和淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK细胞)活性,酶法检测腹腔巨噬细胞分泌一氧化氮合酶(NOS)的活性,用全自动酶标仪检测巨噬细胞吞噬中性红能力,流式细胞仪检测CD3+、CD4+、CD8+淋巴细胞数。(3)灌胃给药10 d后,分别进行负重游泳、耐高温、耐低温、常压缺氧及中毒性缺氧实验,并对常压耐缺氧实验小鼠的心、脑组织总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)进行含量测定。(4)灌胃给药10 d后,取小鼠脾脏匀浆弃上清进行谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、过氧化氢酶(CAT)、SOD的活性及 MDA含量和总抗氧化能力(T-AOC)的检测。 结果:(1)金黄扶正散可不同程度地提高免疫抑制状态下小鼠的胸腺指数、脾脏指数,增强脾脏细胞LDH和ACP活性,提高IL-2和IFN-γ的细胞因子水平、红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、淋巴细胞(LY)、血红蛋白(HGB)数(P<0.01,P<0.05),降低血小板(PLT)数(P<0.05)。(2)金黄扶正散能显著提高免疫抑制小鼠的淋巴细胞增殖能力(P<0.01);不同程度的提高免疫抑制小鼠NK细胞、LAK细胞活性、腹腔巨噬细胞吞噬活性、iNOS活力及 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+淋巴细胞比例(P<0.01,P<0.05),降低免疫抑制小鼠的CD8+淋巴细胞比例(P<0.01,P<0.05)。(3)金黄扶正散对免疫抑制小鼠在上述抗应激实验中的生存时间均比环磷酰胺组延长(P<0.05,P<0.01);可以显著提高免疫抑制小鼠心、脑组织SOD水平(P<0.05,P<0.01);降低心、脑组织MDA水平(P<0.05,P<0.01);显著提高心、脑组织GSH水平(P<0.05,P<0.01)。(4)金黄扶正散可明显提高CAT、SOD、GSH-PX的活性(P<0.05,P<0.01),降低iNOS的活性(P<0.01);明显降低MDA含量(P<0.05);显著提高T-AOC能力(P<0.01)。 结论:以上研究表明,金黄扶正散能提高免疫抑制小鼠免疫器官的功能和细胞免疫功能,增强免疫抑制小鼠巨噬细胞的活性,提高免疫抑制小鼠的抗应激能力和抗氧化能力,从而有效拮抗环磷酰胺对小鼠免疫功能的抑制作用,增强机体的免疫功能,提高防病治病的能力。