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研究背景结肠癌为最常见的恶性肿瘤之一，发病率居胃肠道肿瘤的第3位。结肠癌起病隐匿，发病初期症状不明显，3/4的结肠癌患者在诊断时就已经发生了转移。目前结肠癌主要的临床治疗手段为手术切除，根治术后的患者5年生存率大约在70%左右，有40%~50%患者因术后复发或转移而失去了再治愈的机会。因此，结肠癌根治术患者的术后辅助化疗显得极其重要，借助辅助化疗可以提高患者的生存率，降低复发率及死亡率，从而提高生活质量。近几年来结肠癌的辅助化疗取得了一定的进展,但目前的化疗药物治疗效果仍不理想且毒副作用较大。因此需要具有抗癌活性且毒性低副作用小的新型抗肿瘤药物，越来越多的研究证实组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACIs)在肿瘤治疗的过程中发挥了重要作用,其中丙戊酸钠(Valproic Acid sodium，VPA)属于组蛋白去乙酰化酶抑制剂，在很多临床试验中被证实对多种肿瘤细胞具有明显的抑制增殖及促进分化的作用。本次研究中,我们以结肠癌细胞系HT-29为靶细胞,对VPA诱导肿瘤细胞自噬进行观察,并且发现这一作用可能与Akt/mTOR信号通路的抑制及PI3K-III/Beclin-1信号通路的激活有关,该项研究揭示了VPA抗结肠癌作用可能的分子机制,也为VPA的临床治疗提供了可能的理论研究基础。研究目的观察丙戊酸诱导人结肠癌细胞株HT-29发生自噬性死亡的过程，并进一步研究其诱导自噬发生的可能分子机制。研究方法本实验用丙戊酸钠（1、2、4、6、8、16mmol/L）处理人结肠癌细胞系HT-296h、12h、24h,用CCK8法观察丙戊酸钠对结肠癌细胞HT-29增殖的抑制作用, MDC染色法观察细胞自噬及荧光测试仪检测自噬水平的变化,荧光定量PCR法检测经不同浓度丙戊酸钠处理后结肠癌细胞内LC3-Ⅱ、Beclin-1、mTOR、p-Akt和p-p70S6K基因的表达水平的变化。实验结果经不同浓度丙戊酸钠处理后,人结肠癌细胞HT-29活性明显受到抑制,且抑制作用有明显的剂量和时间依赖性。MDC染色法中，各丙戊酸钠处理组,随着药物浓度的增加，细胞中自噬泡数量增多，荧光强度增强,与对照组比较,差异有统计学意义(分别P<0.05)。荧光定量PCR法示丙戊酸钠各处理组中,与对照组相比，在人结肠癌细胞株HT-29中自噬相关基因Beclin-1和LC3-Ⅱ的表达水平明显升高,而mTOR、p-Akt和p-p70S6K表达水平明显降低。实验结论丙戊酸钠可诱导结肠癌HT-29细胞发生自噬,其诱导结肠癌细胞发生自噬的机制可能与激活PI3K-III/Beclin-1及阻断PI3K-I/AKT/mTOR信号转导通路有关。