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目的应用多重及单一实时聚合酶链式反应(Real-time Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)检测腹膜透析相关性腹膜炎(peritoneal dialysis-associated peritonitis,PDAP)常见致病菌分布,将两种方法结果相比较,旨在探讨实时多重PCR检测腹膜透析相关性腹膜炎致病菌的临床应用价值。方法收集70例患者的腹透液标本,分别行传统细菌培养与荧光染料法细菌通用引物RT-PCR检测。根据70例样本培养结果及相关参考文献,选取最常见的6种PDAP致病菌作为检测菌,设计各检测菌特异引物,分别采用单一及多重荧光探针法RT-PCR,针对通用RT-PCR法检出的阳性样本进行检测。将通用引物RT-PCR与传统培养结果进行比较、单一RT-PCR与多重RT-PCR结果进行比较,用SPSS16.0对病例一般临床资料进行分析。结果1.传统细菌培养结果:70例标本阳性率为65.71%(46/70),G+球菌占71.74%(33/46),G-杆菌占28.26%(13/46);其中表皮葡萄球菌9例、金黄色葡萄球菌3例、溶血葡萄球菌10例、草绿色链球菌6例、大肠埃希菌5例、铜绿假单胞菌3例。2.临床资料结果,70例患者均有腹痛、压痛反跳痛或腹透液浑浊等临床症状和体征,入院时培养阴性组腹透液WBC计数、多核比及CRP水平明显低于阳性组(P<0.05),而血白蛋白水平明显高于阳性组(P<0.05),其余各项资料两组间无统计学差异。3.通用RT-PCR结果:70例样本阳性率为81.42%(57/70),其中2例培养阳性样本通用RT-PCR为阴性。以传统培养作为金标准,通用RT-PCR方法对PDAP致病菌检测的特异性为45.83%,敏感性为95.65%,且检出率明显高于传统培养法,二者差异具有统计学意义。4.对通用RT-PCR法检出的57例阳性样本行单一及多重RT-PCR检测,两者均检出38例样本在6种检测菌范围内,两种方法检测结果一致,1例RT-PCR结果与培养结果不符,剩余19例菌种在6种检测菌范围以外。5.通用RT-PCR可在4~6 h内明确是否存在细菌感染;针对6种致病菌的检测,单一RT-PCR可在6~9 h内完成,多重RT-PCR仅需3 h即可明确菌种。结论与传统培养法比较,RT-PCR方法具有较高灵敏度和特异性,多重RT-PCR因可同时检测多种致病菌,较单一RT-PCR更加迅速、简便、经济。