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目的：建立烟花苷简便、灵敏的LC-MS/MS方法，探讨烟花苷药代动力学、生物利用度、组织分布、排泄特征，并采用TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞损伤模型，观察不同浓度烟花苷对内皮细胞的保护作用。
方法：1.建立SD大鼠血浆中烟花苷的LC-MS/MS测定方法，采用灌胃和尾静脉方法给予烟花苷50mg·kg-1、5mg·kg-1，分别于不同时间点采血，处理血浆并测定烟花苷的含量，运用DAS软件采用非房室模型进行拟合，以获取烟花苷的药动学参数。
2.建立SD大鼠组织中烟花苷的LC-MS/MS测定含量方法，采用同时灌胃给药的方式给予烟花苷50mg·kg-1，分别于不同时间点取大鼠组织（心、肝、脾、肺、肾、脑），处理组织并测定烟花苷的含量。
3.建立SD大鼠排泄物中烟花苷的LC-MS/MS测定含量方法，采用灌胃给药方式给予烟花苷50mg·kg-1，分别于不同时间段接取大鼠的尿液及粪便，处理粪便及尿液并测定烟花苷的含量。
4.在体外进行HUVEC培养，并将实验分组：①正常对照组：细胞无血清培养；②TNF-α组：加50ng·mL-1的TNF-α作用24h；③TNF-α+烟花苷(0.01mg·mL-1)组：烟花苷(0.01mg·mL-1)预处理2h+TNF-α50ng·mL-1作用24h；④TNF-α+烟花苷(0.1mg·mL-1)组：烟花苷(0.1mg·mL-1)预处理2h+TNF-α50ng·mL-1作用24h；⑤TNF-α+烟花苷(1mg·mL-1)组：烟花苷(1mg·mL-1)预处理2h+TNF-α50ng·mL-1作用24h，检测烟花苷是否抑制TNF-α诱导HUVEC上清液NO分泌量。
结果：1.烟花苷药代动力学表明：所建立方法学专属性良好，精密度、稳定性和提取回收率均符合要求，测得的主要药代动力学参数如下：灌胃给药组中烟花苷的Cmax为309.47±58.38ng·L-1，t1/2为19.78±11.01h，AUC0–24h为4314.58±198.24ng·h·L-1；静脉注射给药组中烟花苷的Cmax为63227.46±6993.18ng·L-1，t1/2为5.17±3.31h，AUC0–24h为24601.86±3833.42ng·h·L-1。烟花苷的口服绝对生物利用度为1.7%。
2.烟花苷组织分布结果表明：所建立方法学专属性良好、精密度、稳定性、提取回收率均符合要求，烟花苷在组织中浓度大小为：肝＞肾＞心＞肺＞脾＞脑，给药后2-4h烟花苷在组织中的浓度较高。肝、肾、心中的烟花苷含量较高，脾、肺、脑内的含量较少。
3.烟花苷排泄物结果表明：所建立方法学专属性良好，精密度、稳定性和提取回收率均符合要求，给药24h内烟花苷在尿液、粪便的含量仅为0.001%、0.29%。
4.烟花苷的浓度为0.05～1mg·mL-1时，对细胞无明显毒性作用，烟花苷浓度为2mg·mL-1时，细胞活性降低了28%；50mg·mL-1TNF-α作用24h后，对HUVEC生长抑制率为40%，而1，0.5，0.1，0.05mg·mL-1烟花苷预处理HUVEC细胞后，生长抑制率依次为21.84%，34.78%，36.61%，39.77%；1，0.5，0.1，0.05mg·mL-1烟花苷能使得TNF-α诱导HUVEC上清液NO分泌量相比模型组减少。
结论：药代动力学研究表明，烟花苷生物利用度较低，可能因为烟花苷不稳定，易水解为苷元检测不到，或可能为肠道中某些菌群对药物影响，药物会发生更多的代谢反应，从而使得口服过程中的一部分药物会在肠道内被代谢和失活，吸收入体循环的原型物质减少。组织分布研究表明，烟花苷在肝、肾、心、肺中分布较高，尤以肝脏组织中浓度最高，给药后2h各个组织中烟花苷的浓度均在下降，但肝脏和肾脏中的烟花苷浓度仍较高，提示烟花苷与肝脏、肾脏组织亲和力较高。排泄物研究表明，排泄物中烟花苷原型物质含量较低，主要原因可能为粘附在在肠壁上或者在肠壁上发生代谢。烟花苷对内皮细胞保护实验表明，烟花苷抑制TNF-α诱导的HUVEC细胞分泌NO，具有较好的内皮保护作用。
方法：1.建立SD大鼠血浆中烟花苷的LC-MS/MS测定方法，采用灌胃和尾静脉方法给予烟花苷50mg·kg-1、5mg·kg-1，分别于不同时间点采血，处理血浆并测定烟花苷的含量，运用DAS软件采用非房室模型进行拟合，以获取烟花苷的药动学参数。
2.建立SD大鼠组织中烟花苷的LC-MS/MS测定含量方法，采用同时灌胃给药的方式给予烟花苷50mg·kg-1，分别于不同时间点取大鼠组织（心、肝、脾、肺、肾、脑），处理组织并测定烟花苷的含量。
3.建立SD大鼠排泄物中烟花苷的LC-MS/MS测定含量方法，采用灌胃给药方式给予烟花苷50mg·kg-1，分别于不同时间段接取大鼠的尿液及粪便，处理粪便及尿液并测定烟花苷的含量。
4.在体外进行HUVEC培养，并将实验分组：①正常对照组：细胞无血清培养；②TNF-α组：加50ng·mL-1的TNF-α作用24h；③TNF-α+烟花苷(0.01mg·mL-1)组：烟花苷(0.01mg·mL-1)预处理2h+TNF-α50ng·mL-1作用24h；④TNF-α+烟花苷(0.1mg·mL-1)组：烟花苷(0.1mg·mL-1)预处理2h+TNF-α50ng·mL-1作用24h；⑤TNF-α+烟花苷(1mg·mL-1)组：烟花苷(1mg·mL-1)预处理2h+TNF-α50ng·mL-1作用24h，检测烟花苷是否抑制TNF-α诱导HUVEC上清液NO分泌量。
结果：1.烟花苷药代动力学表明：所建立方法学专属性良好，精密度、稳定性和提取回收率均符合要求，测得的主要药代动力学参数如下：灌胃给药组中烟花苷的Cmax为309.47±58.38ng·L-1，t1/2为19.78±11.01h，AUC0–24h为4314.58±198.24ng·h·L-1；静脉注射给药组中烟花苷的Cmax为63227.46±6993.18ng·L-1，t1/2为5.17±3.31h，AUC0–24h为24601.86±3833.42ng·h·L-1。烟花苷的口服绝对生物利用度为1.7%。
2.烟花苷组织分布结果表明：所建立方法学专属性良好、精密度、稳定性、提取回收率均符合要求，烟花苷在组织中浓度大小为：肝＞肾＞心＞肺＞脾＞脑，给药后2-4h烟花苷在组织中的浓度较高。肝、肾、心中的烟花苷含量较高，脾、肺、脑内的含量较少。
3.烟花苷排泄物结果表明：所建立方法学专属性良好，精密度、稳定性和提取回收率均符合要求，给药24h内烟花苷在尿液、粪便的含量仅为0.001%、0.29%。
4.烟花苷的浓度为0.05～1mg·mL-1时，对细胞无明显毒性作用，烟花苷浓度为2mg·mL-1时，细胞活性降低了28%；50mg·mL-1TNF-α作用24h后，对HUVEC生长抑制率为40%，而1，0.5，0.1，0.05mg·mL-1烟花苷预处理HUVEC细胞后，生长抑制率依次为21.84%，34.78%，36.61%，39.77%；1，0.5，0.1，0.05mg·mL-1烟花苷能使得TNF-α诱导HUVEC上清液NO分泌量相比模型组减少。
结论：药代动力学研究表明，烟花苷生物利用度较低，可能因为烟花苷不稳定，易水解为苷元检测不到，或可能为肠道中某些菌群对药物影响，药物会发生更多的代谢反应，从而使得口服过程中的一部分药物会在肠道内被代谢和失活，吸收入体循环的原型物质减少。组织分布研究表明，烟花苷在肝、肾、心、肺中分布较高，尤以肝脏组织中浓度最高，给药后2h各个组织中烟花苷的浓度均在下降，但肝脏和肾脏中的烟花苷浓度仍较高，提示烟花苷与肝脏、肾脏组织亲和力较高。排泄物研究表明，排泄物中烟花苷原型物质含量较低，主要原因可能为粘附在在肠壁上或者在肠壁上发生代谢。烟花苷对内皮细胞保护实验表明，烟花苷抑制TNF-α诱导的HUVEC细胞分泌NO，具有较好的内皮保护作用。