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目的：肝细胞肝癌(hepatocelluar carcinoma, HCC)是致死率很高的恶性肿瘤之一,目前的治疗手段效果有限。新兴的基因治疗给肿瘤患者带来了新的希望,可以通过组织特异性启动子调控导入细胞的治疗性基因靶向表达。然而,肝癌基因治疗的靶点多集中于肝癌发生发展过程中的相关基因,只能对相应类型的肿瘤起效。在本研究中,我们选择DNA复制环节这一所有细胞增殖的关键步骤作为治疗靶点,来抑制肿瘤细胞生长。方法：本课题构建了包含HCC特异性甲胎蛋白(a-fetoprotein, AFP)增强子的重组AFP启动子调控串联连接的分别靶向DNA聚合酶α,δ,ε的人工microRNA和重组活化Caspase3基因的重组腺病毒Ad/AFP-Casp-AFP-amiR,同时构建仅有重组AFP启动子的重组腺病毒Ad/AFP作为空白病毒对照。结果：体外实验：重组腺病毒以MOI 50感染AFP强阳性的HCC细胞HepG2、AFP弱阳性的HCC细胞Hep3B和AFP阴性的正常肝细胞HL7702, Ad/AFP-Casp-AFP-amiR能够抑制HepG2和Hep3B DNA聚合酶α,δ,ε的表达,阻滞细胞周期在G1期；诱发HepG2和Hep3B细胞凋亡、抑制细胞增殖。Ad/AFP-Casp-AFP-amiR对肝癌细胞的抑制效应与AFP的表达水平正相关。Ad/AFP-Casp-AFP-amiR对正常肝细胞HL7702没有作用。体内实验：建立裸鼠Hep3B移植瘤模型,瘤内注射Ad/AFP-Casp-AFP-amiR,未能观察到明显的抑瘤效应,但能够诱发细胞凋亡。结论：Ad/AFP-Casp-AFP-amiR有望成为新的肝癌基因治疗药物,通过AFP启动子特异性抑制AFP阳性的肝癌细胞DNA聚合酶α,δ,￡表达,阻遏肝癌细胞生长,诱发肝癌细胞凋亡。这一方法基于抑制细胞增殖的关键步骤DNA复制,不局限于某一种基因异常表达的HCC,为肝癌的基因治疗提供了新的思路。