自身抗体是自身免疫性疾病的重要标志物，正常人体内也存在着生理性自身抗体，而自60年代以来，国外文献陆续报道了癌肿患者体内存在抗细胞浆或／和细胞核成分的自身抗体。但长久以来，该领域的研究大多都局限于现象的描述，对癌肿患者体内的自身抗体谱认识还很不深入，相应的靶抗原及临床意义有许多尚未明确。为深入认识肿瘤中以自身抗体为表现的自身免疫现象，从而为肿瘤的诊治提供新的思维和途径，我们做了如下研究：1)应用间接免疫荧光法筛检了肝癌、胃癌、肺癌、直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、膀胱癌等8种共423份常见恶性肿瘤患者血清和140份不同年龄段正常人血清中的自身抗体。从细胞水平对患者自身抗体的阳性率、荧光模式、细胞内定位进行了检测和分析。结果显示：两组人群的自身抗体阳性率皆随年龄增长而增高，而不同年龄段，癌肿组皆显著高于对照组(P＜0.01)；癌肿组与对照组在阳性率、荧光图形、抗体细胞内定位上均有显著差异(P＜0.05)；不同癌肿间，上述结果皆无显著差异(P＜0.05)。2)应用可提取性核抗原(ENA)免疫印迹试剂盒检测分析了95份经IIF检测为自身抗体阳性的癌肿患者血清：提取人喉癌上皮细胞(Hep-2)全细胞蛋白质，作为抗原基质，建立免疫印迹法，检测并分析了227份癌肿患者及48份正常人血清。ENA结果显示：90份出现1条或多条阳性条带，其中抗PM-SCL 2份、抗Ku 7份、抗CENP 5份、抗M，9份、抗RNP 4份、抗SS-A 7份、抗Jo-11份、抗SS-A／SS-B 5份、抗Rib-P-Protein 4份，而另有若干条带对应靶抗原未明。自建蛋白质印迹法中，209份癌肿患者(77.12％)可见抗原抗体反应的阳性条带，显著高于对照组50.00％的阳性率(P＜0.05)；癌肿组抗原谱较宽，相对分子质量分布广泛(20-170KDa)。首次在大肠癌、肺癌、胰腺第二军医大学博士论文 中文摘要癌患者体内发现了6条特定分子量的抗原抗体阳性共带：在67．85％（38／56）肺癌患者血清中查及针对相对分子质量为65KDa的抗原抗体阳性反应共带，该条带仅在16．6汛（缸州）的正常人中查及；捎．代％（26／“）肺癌患者血清中查及针对相对分子质量为45KDa的阳性共带，正常对照组未见该条带；大肠癌患者中共见4种阳性共带，其相对分于质量分别为 90KDa（31／50）、70KDa（34／50）、SSKDa（18／50）、52KDa（18／50），其中除 g0KDa带在 14．58％（7／4S）的正常人中查及外，其余 3种共带均未在厅常人中查及：n份胰腺癌患者（“．利％）血清中查及相对分于质量约为 47KDa的阳性共带，阳性率显著高于正常人（2．OS％，l／48）；胃癌、卵巢癌和乳腺癌患者虽也有较高的自身抗体阳性率，但未观察到较高比例的阳性共带。3）应用蛋白质组血清学策略（Proteomic serological analysiJ鉴定了胰腺癌患者血清中分子量约为47KDa的抗原抗体阳性反应共带对应的靶抗原，命名为胰腺癌相关性自身抗原47（Pancreatlc cancer associated autoantigen 47，PAA47）。通过MASCOT链结平台以及氨基酸和核昔酸序列blast比较，获得了该蛋白质抗原部分生物学功能信息，并对抗PAA47抗体形成原因进行了初步探讨。结果显示：双向电泳图谱分析判断该靶抗原分子量为47KDa，等电点约为pI6．50。经质谱鉴定确定为基因KIAA01 11的编码产物，理论分于量为 46841，理论等电点 PI值为 6．30。该预测蛋白质，共有 411个氨基酸，具有 DEAD／DEAll bOX解旋酶家族特有的 DEAD／DEAH bOX基序，属于 DEAD样解旋酶超家族，参与 RNA双体的解旋，可能与删A的多种代谢过程有关，并参与 mRNA 的加工。BI ast 比较显示该蛋白质与人翻译起始因于（eFkaFvotlc（ranslatlon Inltlationfactor，e1F）有很高的同源件，与多种不同物种的翻译起始因子有较高同源性。半定量PCR法显示胰腺癌组织与正常胰腺组织中 PAA47编码基因序列一致，但前者中 PAA47基因表达水平高于后者（P＜0．05），提示胰腺癌组织中该基因的表达异常上调，可能是患者体内出现抗PAA47的原因之一。4） 通过基因工程手段构建了的E30－PAA47原核表达载体，在宿主菌川 中诱导表达出＊刷7融合蛋白，并通过N卜螫合柱亲和层析和n｝Mm分离后洗脱回收，获得了PAA47融合蛋白纯化物。以后者为抗原基质建立了ELISA法，检测了60名健康体检者、60例胰腺癌、20例慢性胰腺炎以及非胰腺癌的其他消化系统肿瘤 ．Z第二军医大学博土论文 中文摘要患者（后者包括大肠癌、肝癌、胃癌、肺癌各30例）血清中的抗PAA47，初步探讨了PAA47抗体在诊断胰腺癌中的意义。结果显示：胰腺癌患者中该抗体阳性率为31．67％、大肠癌为10．00％、肝癌为3．33％、胃癌为6．67％，正常人、慢性胰腺炎及肺癌患者中未见阳性。抗PAA47对胰腺癌的敏感性为31．67％，特异性为97．09％。以慢性胰腺炎患者为对照，PAA47的敏感性为引．67％、特异性为100％，而CA19－9的灵敏度为75．00％、特异性为86．96％。平行法?