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油菜是我国重要的油料作物之一,菜籽粕中含有菜籽蛋白,我国现在多将其用于饲料和肥料,这造成了一定的资源浪费,因此加强对其的升值加工研究是一项有重要意义的工作。本文以脱脂菜籽粕为原料制备菜籽清蛋白,再用碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶对菜籽清蛋白进行分步水解制备菜籽肽粗品,试验获得了较好的菜籽清蛋白提取条件,并优化得到了较好的分步水解制备菜籽肽粗品的条件,同时对菜籽肽粗品的抗氧化活性进行了研究。试验获得的主要结论如下:(1)菜籽清蛋白的制备:取100g脱壳脱脂干燥菜籽粕于2L的烧杯中,加入1000mL蒸馏水,40℃下搅拌浸提1h,6000 rpm、4℃离心20 min,过滤上清液得到沉淀,按上述步骤再进行相同的浸提操作3次。合并4次所得的上清液,用1 mol/LHCl沉淀上清液,调pH至4.0后6000 rpm、4℃离心10 min获得沉淀,将沉淀置于蒸馏水中透析24h,并在第8h、16h分别更换蒸馏水,然后真空冷冻干燥即可得到蛋白质含量达82.05%的清蛋白。(2)菜籽清蛋白主要功能性质如下:吸水性326.88%,吸油性为4.30mL油/g清蛋白,起泡性为66.00%,乳化性及乳化稳定性分别为29.80%和35.53%。(3)本文选用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶对菜籽清蛋白进行分步水解研究,在单因素试验的基础上,结合正交试验得到双酶水解的最佳条件为:取底物浓度3.5%的清蛋白,先用碱性蛋白酶4000U/g于温度55℃,pH8.0的条件下,水解3h,再加入木瓜蛋白酶3000U/g,在50℃,pH5.5的条件下水解3h,水解度可达到40.17%。(4)菜籽肽粗品具有较强的还原能力,其还原能力随其浓度的增加而增强。菜籽肽粗品具有清除超氧阴离子和抑制羟自由基的作用,其对超氧阴离子的的IC50值为6.60mg/mL,其抗氧化作用均随菜籽肽粗品浓度的增加而增强,并呈现一定的量效关系。通过灌胃小鼠菜籽肽粗品100、200、400 mg/kg·d 40天,结果显示可以提高小鼠抗氧化能力,使小鼠肝和肾中的超氧化物歧化酶(SOD)活性提高,丙二醛(MDA)含量显著减少。