干扰YAP1对食管癌Eca-109细胞生物学功能的影响

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目的:应用RNAi技术研究Yes相关蛋白1(Yes-associated protein1, YAP1)对Eca-109细胞生物学功能的影响,为进一步研究YAP1在食管癌发生、发展中的作用以及食管癌基因靶向治疗方向提供一定的理论基础。方法:由上海吉凯基因化学技术有限公司构建包含针对YAPI基因的shRNA慢病毒载体,将食管癌Eca-109细胞分为三组(慢病毒转染组、空病毒转染组、空白对照组),再用慢病毒载体、空病毒载体分别转染至食管癌Eca-109细胞,采用qPCR和蛋白印迹法检测转染前后食管癌Eca-109细胞中YAPI mRNA和蛋白以及P53蛋白的表达情况;流式细胞仪检测细胞周期、凋亡情况;CCK8实验检测细胞的增殖情况变化。并对以上结果通过SPSS20.0统计软件进行统计分析。结果:慢病毒转染组细胞内YAP1 mRNA和蛋白表达量低于空白对照组和空病毒转染组,P53基因表达量高于空白对照组和空病毒转染组;Eca-109细胞转染组增值率从第3天开始低于空病毒转染组及空白对照组(P<0.05);慢病毒转染组细胞G1期比例较空白对照组和空病毒转染组增高(P<0-05),早期凋亡率明显增加(P<0.05),以上差距均有统计学意义。结论:结果显示干扰YAP1可成功诱导Eca-109细胞凋亡,降低Eca-109细胞的增殖能力,且YAP1抗凋亡及降低食管癌Eca-109细胞增殖能力的作用可能部分与P53基因相关。干扰YAP1可能成为食管癌基因靶向治疗的进一步研究方向。
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