1目的:运动损伤中骨骼肌损伤是常见损伤之一。虽然骨骼肌有自我修复的能力,但是过度损伤将导致骨骼肌功能性退化。研究发现骨骼肌损伤时,针刺能减少骨骼肌损伤,但具体机制尚未明了。另外还有研究发现针刺与calpains有密切的关联。因此本实验旨在探讨calpains在针刺效应后对骨骼肌损伤的作用。2方法:大鼠适应环境1周后,采用随机分组法将72只健康雄性wistar大鼠,随机分为4组。安静组(C)、运动组(E)、运动针刺组(EA)、运动针刺加TRP通道阻断剂组(EAI)。安静组(C)不作任何的干预。运动组(E),运动加针刺组(EA),运动针刺加阻断剂组(EAI)进行90 min离心运动且负荷相同。此离心运动为下坡跑运动,跑台坡度为-16°,速度为16 m·min-1,每组运动时间为5 min,共18组,组间休息2 min。EA组运动完成后仅进行一次斜刺(斜刺角度为300)大鼠的股中肌。斜刺股中肌时,留针的时间为4min此期间不可做任何的的转捏提插等动作。EAI组完成运动后,立即注射0.2%的Gdcl3盐溶液,然后进行一次斜刺(斜刺角度为300)大鼠的股中肌。最后各组分别在1h、48h、120h取大鼠下肢股中肌。将取得的左下肢股中肌使用SDS聚丙烯酞胺凝胶电泳观察蛋白活性,右下肢股中肌采用透射电镜观察骨骼肌的超微结构Z线。3结果:3.1针刺干预对calpains的变化影响:(1)与C比较:E较C组calpain-1,calpain-3均呈递增的趋势,均与C组显著性增加(P<0.05),calpain-2非常显著性增加(P<0.01)。EA较C组显著性增加(P<0.05)。EAI较C组显著性增加(P<0.05);(2)同一时相不同组别比较:EA组较E组calpain-1、calpain-2、calpain-3均呈下降的趋势,均与E组显著性差异P<0.05;EAI组较EA组calpain-1、calpain-2、calpain-3均呈上升的趋势。均与EA组显著性差异P<0.05。(3)同一组别不同时相比较:calpain-1和3的E组在48h时达到峰值,1h和120h分别与48h相比时,P<0.05均为显著性差异。calpain-2E组在48h时达到峰值,1h和120h分别与48h相比时P<0.01,calpain-2均为非常显著性差异;calpain-1的EA组48h达到峰值,1h和120h分别与48h相比calpain-1分别为P<0.01非常显著性差异和P<0.05显著性差异。calpains-2和-3的EA组120h达到峰值,1h和48h分别与120h相比P<0.05,均为非常显著性差异;calpain-1、2、3的EAI组120h达到峰值,1h和48h分别与120h相比P<0.05均为显著性差异。3.2针刺干预骨骼肌超微结构Z线排列的影响:Z线完整性、Z线断裂情况、Z线模糊变化。(1)与C组比较,P<0.01Z线完整性均显著减少,P<0.01Z线断裂均极其显著增加,48h P<0.01Z线模糊变化非常显著增加;(2)同一时相不同组别比较,1h时E与EA组比P<0.05,Z线完整性显著减小,Z线断裂性和模糊性显著增加。EAI与EA组相比P<0.05 Z线完整性显著减小,Z线断裂性和模糊性显著增加;48h时E与EA组比P<0.05,Z线完整性显著减小,Z线裂性和模糊性显著增加,EAI与EA组相比P<0.05,Z线完整性显著减小,Z线裂性和模糊性显著增加。120h时E与EA组比P<0.05,Z线完整性显著减小显著减小,EAI与EA组相比P<0.05,Z线完整性显著减小显著减小。所以,离心运动破坏Z线的完整性,增加了Z线的模糊和断裂的情况。而针刺可以恢复Z线的模糊和断裂的情况。(3)同一组别不同时相比较,EA与E相比,1 h、48h、120hP<0.01Z线完整性非常显著增加,48h P<0.01断裂模糊非常显著减小;EA组与EAI组比较,P<0.01完整性非常显著增加,48h P<0.01断裂非常显著减小。4结论:4.1急性离心运动引起骨骼肌细胞calpain-1、2、3活性增加,造成了骨骼肌超微结构损伤。4.2针刺下调了急性离心运动骨骼肌calpain-1、2、3活性,减轻了肌节结构损伤程度,其效应机制与TRP通道活性有关。