7-酮胆固醇与3β,5α,6β-三羟胆固醇对血管平滑肌细胞的损伤

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用原代培养的大鼠平滑肌细胞为实验模型,选择在动脉粥样斑块中常见的两种氧化型胆固醇,7-酮胆固醇(7-Keto)和三羟胆固醇(Triol),研究氧化型胆固醇对平滑肌细胞的损伤;用三种抗氧化剂维生素E,丁基甲酚(BHT),与去铁敏研究氧化型胆固醇损伤平滑肌是否与氧应激有关.观察了相差显微镜和荧光显微镜下的细胞形态和核形态;用四氮唑溴盐(MTT)法测定细胞存活率;用流式细胞术测定细胞膜的完整性、细胞凋亡和细胞周期;用DCFH-DA为荧光探针测定细胞内自由基生成;荧光分光光度法测定胞内GSH含量;用激光共聚焦扫描显微术测定细胞游离钙浓度和pH值变化.测定了维生素E、BHT和去铁敏对7-Keto和Triol作用后细胞存活率和胞内自由基产生的影响,测定了维生素E对7-Keto和Triol引起平滑肌细胞其他指标变化的影响.因此该实验表明,7-Keto和Triol与平滑肌细胞作用过程中虽有自由基生成,但是7-Keto和Triol对细胞的损伤主要不是通过自由基途径,应该还有其他机制.
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