表皮生长因子对断奶仔猪肠道功能与上皮细胞更新的影响及机制研究

来源 :湖南师范大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:q258007
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本文旨在研究表皮生长因子(epidermal growth factor;EGF)对断奶仔猪肠道功能与上皮细胞更新的影响及机制。将42头21日龄断奶仔猪(杜×长×大;初始体重为6.44±0.12 kg)随机分为三组:(1)基础日粮(对照组);(2)基础日粮+200μg/kg EGF;(3)基础日粮+400μg/kg EGF。每组有14头仔猪,进行为期14天的试验。在试验的第7天各组随机选取7头仔猪采集样品,剩余的仔猪在试验的第14天屠宰采样用于分析仔猪生长性能、营养物质消化率,小肠形态学、消化酶活性、营养物质转运载体的表达、肠道上皮细胞增殖分化以及表皮生长因子受体(EGFR)、Wnt/β-catenin和mTOR信号通路的活性。结果表明:(1)断奶仔猪的生长性能在各处理组间没有显著差异(P>0.05)。在试验的第14天,200μg/kg EGF显著提高了粗蛋白的表观消化率(P<0.05),趋向于增加磷的消化率(P=0.094)。同时,400μg/kg EGF显著提高了钙的表观消化率(P<0.05)。(2)在试验的第7天,200μg/kg EGF趋向于增加小肠远段绒毛高度(P=0.069)和小肠近段绒毛高度与隐窝深度的比值(P=0.060),但是降低了小肠中段绒毛宽度(P<0.05)。在试验开始后的第14天,日粮中添加200μg/kg EGF提高了小肠中段绒毛高度、隐窝深度和绒毛高度/隐窝深度(P<0.05)。(3)日粮中添加400μg/kg EGF趋向于降低小肠中段粘膜中蔗糖酶活性在试验的第7天(P=0.060)和第14天(P=0.098)。200μg/kg EGF增加了转运载体Slc2a2,Slc6a19和Slc15a1 mRNA的表达以及转运蛋白SGLT1和PEPT1的表达量(P<0.05)。然而,转运载体Slc5a1,Slc7a1,Slc1a1,VDR和TRPV6的表达水平在各组间没有显著差异(P>0.05)。此外,日粮中添加400μg/kg EGF增加了钙转运载体S100G mRNA的表达水平(P<0.05)。(4)在整个试验时期,200μg/kg EGF显著增加了小肠近端、小肠中段和小肠远段Ki-67阳性细胞数(P<0.01)。在试验的第7天,饲喂200μg/kg EGF降低了脂肪酸结合蛋白(I-FABP)的表达量(P<0.05)。在试验的第14天,400μg/kg EGF上调了碱性磷酸酶mRNA的表达水平(P<0.05);200μg/kg EGF趋向于提高细胞增殖核裂原mRNA的表达(P=0.066)。(5)在整个试验时期,200μg/kg EGF增加了小肠近端、小肠中段和小肠远段杯状细胞数和内分泌细胞数(P<0.05)。在试验的第7天,400μg/kg EGF上调了溶菌酶蛋白水平和mRNA的表达(P<0.05)。(6)日粮中添加200μg/kg EGF显著增加了杯状细胞功能标志基因mucin2和ITF3以及分泌细胞分化转录因子Atoh1 mRNA的表达水平(P<0.05)。与对照组相比,200或400μg/kg EGF组增加了转录因子Gif1,SPDEF和Pdx1的表达量(P<0.05),但是降低了转录因子Elf3mRNA的表达水平(P<0.05)。(7)日粮中添加200μg/kg EGF提高了绒毛上皮细胞中EGFR的表达和non-p-β-catenin与β-catenin的比值(P<0.05)。然而隐窝上皮细胞中EGFR的表达在各组间均没有显著差异(P>0.10)。此外,日粮中添加200或400μg/kg EGF提高了小肠粘膜中mTOR的磷酸化水平和隐窝上皮细胞中non-p-β-catenin/β-catenin的值(P<0.05)。以上结果表明,低剂量EGF(200μg/kg)改善了断奶仔猪肠道形态结构和消化吸收功能,而且EGF通过影响EGFR、Wnt/β-catenin和mTOR信号通路促进了肠道上皮细胞的增殖分化。因此,EGF可以作为一种饲料添加剂改善断奶仔猪肠道发育。
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