目的：利用表达小干扰RNA原理构建表达miR-10a*的重组腺病毒(adenovirus，Ad)，探讨miR-10a*对柯萨奇病毒B组3型(coxsackievirus B3，CVB3)复制的作用。　　 方法：用红色荧光蛋白mCherry基因替换穿梭质粒pDC316-EGFP-U6的EGFP报告基因。利用表达siRNA的策略，合成编码miR-10a*的长链DNA序列，双链退火后克隆至pDC316-mCherry-U6获得pDC316-mCherry-U6-miR-10a*。pDC316-mCherry-U6-miR-10a*与骨架质粒pBHGlox△E1，3Cre共转染HEK293细胞，包装获取重组腺病毒Ad-miR-10a*，空斑形成试验纯化、扩增、滴定重组腺病毒。Ad-miR-10a*感染HeLa细胞与原代心肌细胞，通过RT-qPCR及荧光显微镜，观察miR-10a*在心肌细胞中对CVB3复制的影响。　　 结果：构建的pDC316-mCherry-U6-miR-10a*序列正确，荧光显微镜下可见mCherry的表达，重组腺病毒Ad-miR-10a*滴度为1.8×107pfu/mL，感染HeLa细胞后miR-10a*表达较mock高5倍。感染等量EGFP-CVB3的心肌细胞中，感染Ad-miR-10a*组带有绿色荧光的心肌细胞数明显多于对照组。　　 结论：成功构建了表达miR-10a*的重组腺病毒，该重组病毒Ad-miR-10a*可促进CVB3在心肌细胞中的复制。