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本文主要从以下几方面展开论述： 第一部分 荜茇酰胺选择性杀伤胶质母细胞瘤细胞的作用和机制 研究背景：荜茇酰胺（Piperlongumine,PL）是一种从长柄胡椒中分离出的天然生物碱，具有选择性杀伤一些肿瘤细胞的作用。但荜茇酰胺是否对胶质母细胞瘤具有杀伤作用还不清楚。本实验主要研究荜茇酰胺对胶质母细胞瘤细胞的杀死作用和机制。 方法：3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)实验和流式细胞仪方法测定细胞活力和凋亡。Hoechst33342核染色观察细胞死亡。Western blot测定p-JNK/JNK、p-p38/p38、p-Erk/Erk和p-Akt/Akt等蛋白表达水平。DCFH-DA染色测定活性氧水平。微量谷胱甘肽试剂盒测定细胞内谷胱甘肽的水平。流式细胞仪检测细胞周期。 结果：荜茇酰胺（20μM）可诱导三种胶质母细胞瘤细胞株(LN229，U87和8MG)细胞死亡，而对原代培养的大鼠星形胶质细胞则无明显杀伤作用。荜茇酰胺显著升高LN229和U87细胞中活性氧（ROS）水平，同时降低还原型谷胱甘肽（GSH）水平。抗氧化剂N-乙酰基-L-半胱氨酸（NAC）完全逆转荜茇酰胺对LN229和U87的细胞杀伤作用和活性氧升高。荜茇酰胺处理 LN229和U87细胞后显著激活JNK和p38，具有剂量依赖性，但对Erk和Akt激活无影响。NAC完全阻断荜茇酰胺对JNK和p38的激活作用。JNK和p38特异性抑制剂SP600125和SB203580明显降低由荜茇酰胺诱导的细胞死亡。 结论：荜茇酰胺通过诱导活性氧水平升高，进而激活JNK和p38，发挥选择性杀伤胶质母细胞瘤细胞的作用。 第二部分 荜茇酰胺杀伤肝癌细胞的作用和机制 研究背景：荜茇酰胺可通过升高ROS水平特异性杀死癌细胞，具有肿瘤治疗前景。但荜茇酰胺对肝癌细胞的作用尚未见报道。本实验主要研究荜茇酰胺体内外杀伤肝癌细胞的作用和机制。 方法：MTT实验测定细胞活力。Hoechst33342核染色、PI染色和台盼蓝染色观察细胞死亡。DCFH-DA染色测定活性氧水平。微量谷胱甘肽试剂盒测定细胞内谷胱甘肽的水平。Fluo-3AM荧光探针测定细胞内Ca2+的变化。Wetern blot测定内质网应激和凋亡相关蛋白表达和激活水平。H22细胞皮下注射构建体内肝肿瘤模型，检测荜茇酰胺在体内的肝癌治疗作用。 结果：荜茇酰胺的肝癌细胞(HepG2和Huh7)半数抑制浓度(IC50)为10-20μM。荜茇酰胺显著提高肝癌细胞ROS的水平并降低还原型谷胱甘肽水平。NAC和GSH完全逆转荜茇酰胺诱导的细胞死亡。荜茇酰胺引起肝癌细胞的内质网应激反应致使Ca2+释放，PERK、p38和JNK激酶活化，Grp78、IRE1α、CHOP（GADD153）蛋白表达升高。在H22细胞的肝癌模型中，荜茇酰胺明显抑制肿瘤生长。 结论：荜茇酰胺通过升高ROS干扰内质网应激发挥体内外杀伤肝癌细胞的作用。