张氏肝细胞Chang liver cell移植改善急性肝衰竭的预后

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【目的】Chang liver细胞是一种肝肿瘤细胞系,其是否可用于生物人工肝支持系统尚未见报道。本研究通过体内外实验验证其肝细胞功能,旨在寻找一种新的细胞源。【方法】通过Western-Blotting和激光共聚焦检测Chang liver细胞的肝细胞特异性蛋白表达情况,在体外评估其肝细胞功能。采用RT-PCR从基因水平检测肝细胞功能相关基因的表达情况。采用SD大鼠90%肝切除术诱导急性肝衰竭(ALF)模型。取生长良好的Chang Liver细胞移植入大鼠脾脏内,并于移植后24小时行90%肝切除术诱导急性肝衰竭,每隔24小时采血一次,测定其肝功能指标变化情况。并统计生存率。【结果】在体外,Western-Blotting和激光共聚焦清晰的显示了Chang Liver细胞表达肝细胞特异性标志蛋白,如白蛋白(ALB)、葡糖醛酸基转移酶(UGT)及细胞色素酶P450(CYP3A4)。RT-PCR同样可检测到相关基因在mRNA水平的表达。在体内,实验组接受Chang Liver细胞移植,其长期生存率达到40%,而对照组的长期生存率为0(P<0.01)。移植Chang Liver细胞的大鼠肝功能在急性肝衰竭后24小时较对照组获得明显的改善,表现为血样标本中谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST),胆红素和碱性磷酸酶(ALP)等指标的下降(ALT,619.33±85.64vs.1798±424.06μ/l, G2vs. G1;AST,1732.83±162.37vs.3033.25±506.73μ/l, G2vs. G1;ALP,330.33±26.18vs.511.6±40.25μ/l, G2vs. G1; p<0.05)。【结论】实验表明,Chang Liver细胞可像正常肝细胞一样表达功能蛋白,明显改善急性肝衰竭大鼠的肝功能,改善存活率,可以作为生物人工肝支持系统较好的细胞源。
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