目的：目前对于乳腺癌发病机制仍旧没有一个明确结论，多数研究认为乳腺癌的发生是一个激素依赖性复发的过程。乳腺导管从导管分支形成直至导管腺泡成熟是在不同激素的共同作用下完成的。在哺乳类动物如啮齿类动物中，催乳素可以通过自分泌和旁分泌的方式，作为一种细胞因子调控乳腺发育，促进乳汁生成，维持泌乳。催乳素是由脑垂体合成并分泌的多肽类激素，通过间接或直接的方式促进乳腺发育，实验表明催乳素可能对乳腺干细胞产生一定影响。根据不同的细胞表面抗体可以将消化后的乳腺上皮细胞分为基底细胞群和管腔细胞群。垂体分泌催乳素受到自身下丘脑调控，当把脑垂体移植到异体环境后，脑垂体可以不受控制自行分泌催乳素。基于以上研究，本研究通过细胞体外移植技术及细胞传代探讨催乳素对乳腺干细胞功能的影响。　　方法：比较了脑垂体分泌的催乳素不同时间下对小鼠乳腺干细胞发挥作用的不同。将2-3月龄的C57BL/6-WT雌性小鼠随机分为两组，做脑垂体移植处理，1周和3周后采集小鼠胸腺处和腹股沟处乳腺组织，一部分乳腺组织通过整体染色进行形态分析以及通过切片进行病理分析；剩余乳腺组织经过消化得到乳腺上皮细胞悬浮液后，用细胞表面不同的抗体(CD24,CD49f)标记结合流式分选将乳腺上皮细胞的不同类群分离，分为乳腺基底细胞亚群和管腔细胞亚群。将乳腺的形态、乳腺导管的增生情况，乳腺上皮细胞比例的变化等进行比较，从而确定较好的作用时间。研究催乳素对青年期小鼠及老年期小鼠乳腺干细胞的影响。选用2月龄的FVB-GFP小鼠，脑垂体移植处理3周后，采集血液、脾脏。血液经离心得到血清后，选用ELISA试剂盒进行激素测定；脾脏称取重量，与体重相比测定脏器指数。采集小鼠胸部和腹股沟部的乳腺组织，均一分为二，进行乳腺形态分析和病理切片染色；其余乳腺组织分为胸腺处乳腺和腹股沟处乳腺进行组织消化后制成单细胞悬液，处理方法同第一部分。老年期小鼠选用17-18月龄的C57BL/6-GFP小鼠，脑垂体移植处理时间为2个月，处理方法同青年期小鼠。探究催乳素对青年期小鼠乳腺干细胞功能的影响。选用C57BL/6-GFP小鼠将流式分选后的基底细胞和管腔细胞计数后移植到去除乳腺上皮细胞的同品系小鼠的脂肪垫中，8周之后采集乳腺，对比分析乳腺导管再生比例及导管所占脂肪垫比例，将再生乳腺做病理切片染色分析，对比分析再生乳腺非典型性增生比例的不同。剩余的管腔细胞进行细胞微球培养以及进行3D传代，对比分析对照组和处理组的传代能力。根据以上研究结果，本研究的第四部分为利用第二、三部分所得的小鼠乳腺和乳腺上皮细胞进行免疫组织化学染色和免疫荧光染色，观察相应蛋白的表达情况，以此来探究催乳素发挥作用的机制。　　结果：脑垂体移植处理3周较1周效果更为显著。青年期小鼠乳腺较老年小鼠乳腺更易受到催乳素影响，催乳素促使青年期小鼠乳腺导管分支显著性增加，老年期小鼠乳腺导管增粗；青年期及老年期小鼠腺导管非典型性增生比例增加；青年期小鼠乳腺上皮细胞比例显著性改变，老年期小鼠乳腺上皮细胞比例无显著性变化；且青年期小鼠胸腺处乳腺较腹股沟处乳腺更易受到影响。催乳素对青年期小鼠乳腺干细胞和管腔祖细胞的再生能力有一定影响，再生乳腺非典型性增生比例显著性增加；催乳素使得乳腺微球形成率降低，改变管腔细胞3D空心结构比例。催乳素下游信号通路元件Stat5蛋白的表达升高，催乳素可能使得激素信号通路发生改变;细胞集落培养后，细胞集落中管腔细胞群所占的比例下降。从以上结果可以推测出青年小鼠的乳腺干细胞较老年老鼠更易受到影响，催乳素使得青年小鼠及老年小鼠乳腺癌前病变增加。　　结论：催乳素使得青年期小鼠和老年期小鼠乳腺癌前病变增加，青年小鼠的乳腺干细胞更易受到催乳素的影响；催乳素使得乳腺激素下游信号通路元件Stat5发生改变；催乳素改变乳腺上皮细胞中基底细胞和管腔细胞的比例，可能使得一部分管腔细胞向基底细胞转变。我们的结果为进一步探索催乳素的作用及乳腺癌的治疗和预防提供了新的参考。