水稻几丁质酶基因的克隆与表达

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本研究以水稻幼嫩叶片为材料,提取水稻基因组DNA,以其为模板利用PCR技术扩增得到水稻几丁质酶基因chAB和ch24。分别将其克隆到载体pUC18-T上,并进行测序。chAB长为861bp,属于几丁质酶classⅢ;ch24长为972bp,属于几丁质酶classⅠ。将chAB和ch24分别克隆到原核表达载体pET-32a上,构建重组原核表达载体pAB-32a和p24-32a。通过正交试验优化得到pAB-32a重组蛋白的最佳表达条件为0.6mM IPTG诱导浓度,培养基pH7.0,30℃下20
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