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第一部分
目的：研究免疫性血小板减少症(thrombocytopenia，ITP)患者血浆17-β雌二醇水平(17-βestradiol，E2)及外周血单个核细胞(peripheral blood monocytes PBMCs)雌激素受体α(estrogen receptor，ERα)的表达水平，探讨其在ITP发病机制中的作用。
方法：采集外周血，ELISA方法检测外周血血浆E2、游离睾酮(FT)水平；实时定量RT-PCR方法检测ERα的mRNA水平；流式方法检测患者外周血单个核细胞CD19CD20B细胞的ERα的蛋白表达水平；PBMCs培养，分E、I、E+I、K组，分别给药物E210-5mol/L，雌激素阻断剂ICI182，78010-5mol/L，E2及I，培养基，培养72小时，检测细胞增殖情况，ELISA方法检测上清干扰素-γ(IFN-γ)表达水平，实时定量RT-PCR方法检测所培养单个核细胞的IFN-γ的mRNA水平；外周血单个核细胞培养，分E、T、K组，分别给药物E210-5ol/L，雌激素拮抗剂他莫昔芬(tamoxifen)10-5mol/L,培养基，培养72小时，流式方法检测CD4细胞中CD4CD25FoxP3Treg细胞比例。
结果：儿童及青少年组患者，治疗后未缓解组(n=11)血浆E2水平(169.49±33.81pmol/L)显著高于正常对照组(n=29)(82.72±63.55pmol/L)(P＜0.05)。成年患者，活动期未用药患者(n=41)，用药未达缓解患者(n=23)，完全缓解患者(n=13)及健康对照(n=49)，各组间血浆E2水平无显著差异(P＞0.05)。活动期未治疗组患者(n=48)血浆FT水平(46.71±59.89pmol/L)显著低于正常对照组(n=57)(46.71±59.89pmol/L)(P＜0.05)。活动期未用药患者(3.27±1.15)E2/FT值显著高于正常对照组(2.57±1.36)(P＜0.01)。治疗疗未达缓解组(n=37)E2/FT值(4.14±3.39)显著高于治疗达完全缓解组(n=19)(2.43±0.94)(P＜0.05)。活动期未治疗组(n=22)外周血PBMCs的ERαmRNA表达水平（中位数0.55969，0.010417-2.221822)显著低于正常对照组(n=25)（中位数0.97525，0.11472-2.63044）(P＜0.05)。活动期未用药组(n=8)外周血PBMCs的ERβmRNA表达水平（中位数1.89487，0.091-5.784202）显著高于正常对照组(n=10)（中位数0.3889，0.002-1.092）(P＜0.05)；用药未达缓解患者外周血PBMCs的ERβmRNA表达水平(n=8)(中位数4.27884，0.079039-18，837)显著高于正常对照组(n=10)(P＜0.05)。活动期未用药患者(n=18)外周血PBMCs中CD19+CD20+细胞的ERα的蛋白表达水平(66.30％±18.01％)均显著高于完全缓解患者(n=12)(34.49％±17.36％)及正常对照(n=13)(18.32％±9.67％)(P＜0.001);治疗未达缓解组(n=9)外周血PBMCs中CD19CD20细胞ERα的表达水平(63.63％±23.76%)显著高于完全缓解组(P＜0.05)及正常对照组(P＜0.001)：完全缓解组外周血PBMCs中CD19CD20细胞ERα的表达水平显著高于正常对照组(P＜0.05)。患者雌激素阻断剂ICI182，780组PBMCs增殖力低于对照组(n=13)(P＜0.05)。活动期未用药患者(n=16)，17-β雌二醇组细胞培养上清IFN-γ水平显著高于对照组、ICI182，780组及17-β雌二醇+雌激素阻断剂组(P＜0.05)；糖皮质激素使用中患者(n=13)，17-β雌二醇组细胞培养上清IFN-γ水平显著低于对照组(P＜0.05)。在ITP患者(n=10)，E组CD4细胞中CD4CD25FoxP3+Treg细胞比例（中位数3.371％，0.093％-4.9％)显著低于K组（中位数4.7192%，0.346％-20.9％）(P＜0.05)，T组CD4-细胞中CD4CD25FoxP3Treg细胞比例（中位数6.092%，0.39%-25.4％）显著高于K组(P＜0.01)；在健康对照组(n=5)，E组CD4细胞中CD4CD25FoxPTreg比例（中位数21.6578％.0.559％-37.7%）显著低于K组（中位数11.4966%0.263％-11.8％）（P＜0.05）。
结论：在ITP患者，血浆E2/FT比值增高，雌激素阻断剂对PBMCs具有抑制增殖的作用；E2促进PBMCs分泌IFN-γ，糖皮质激素逆转该作用；存在PBMCs的ERαERβmRNA表达水平偏移；PBMCs中CD19CD20细胞的ERα的蛋白表达水平增高；E2抑制CD4CD25FoxP3-3 Treg细胞表达，他莫昔芬促进CD4CD25FoxP3Treg细胞表达。
第二部分
目的：研究低剂量利妥昔单抗对中国ITP患者的的疗效和安全性。
方法：选择对多种治疗效果不佳、激素依赖或复发的ITP患者入组。给予每周一次100mg利妥昔单抗治疗（方案1），共四周；或375mg/m2利妥昔单抗治疗一次（方案2）。
结果：包括78例成人和28例儿童的106例原发性ITP患者和7例结缔组织病继发免疫性血小板减少性紫癜患者(CTD-sITP)被成功随访超过3个月并评估疗效。78例成人患者，总体反应(OR)率、完全缓解(CR)率分别为65%(53/78)和37％(29/78)。患者在方案1和方案2的OR、CR和部分缓解(PR)率无显著差异(OR，70％vs67％，chi-square test,P=0.094,P＞0.05;CR,27％vs44％,chi-square test,P=0.129,P＞0.05;PR,43％vs23％，chi-square test，P=0.057，P＞0.05)．成人患者中65例患者检测了外周血甲状腺激素水平，甲状腺功能正常的30例患者中87%(26/30)获得治疗反应，包括47%(14/30)的患者获得CR;而甲状腺功能异常的35例患者中只有51％(18/35)获得治疗反应，包括23%(8/35)的患者获得CR。对于成人ITP患者，OR和CR率在甲状腺功能正常组显著高于甲状腺功能异常组(P1=0.002，P2=0.043，P＜0.05)。获得治疗反应的患者，中位反应时间是31天（3-180天），平均随访时间是15个月（3-32个月）。53例获得治疗反应的患者中12例(23%)于随访期间复发。28例儿童患者，总体反应(OR)率、完全缓解(CR)率分别为32%(9/28)和18％(5/28)。患者在方案1和方案2的OR、CR和部分缓解(PR)率无显著差异(P1=0.165，P2=0.574，Fishers exact test，P＞0.05)。儿童患者中13例患者检测了外周血甲状腺激素水平，甲状腺功能正常的7例患者中43％(3/7)获得治疗反应，包括29%(2/7)的患者获得CR;而甲状腺功能异常的6例患者均未获得治疗反应。对于儿童ITP患者，OR和CR率在甲状腺功能正常组显著高于甲状腺功能异常组(P1=0.122，P2=0.229，Fisher’s exact test，P＞0.05)；获得治疗反应的患者，中位反应时间是61天（27-180天）平均随访时间是12个月（3-31个月）。CTD-sITP患者,3例患者行方案1治疗,4例患者行方案2治疗。中位随访时间为12个月(6-17个月)。总体反应(OR)率和完全缓解(CR)率分别为(6/7)86％ and(3/7)43％。中位起效时间为51天（20-152天）。在对治疗有反应的患者中,4人在随访期间复发，中位复发时间116天（30-210天），2人持续缓解。总体中位治疗反应持续时间为6个月（1-15.5月）。随访期间，所有患者未出现显著感染等严重不良反应。OR率在成人显著高于儿童(53/78，65％vs9/28,32％：P=0.001，P＜0.05，Chi-Square test)。在结缔组织病继发的ITP患者,3例患者行方案1治疗,4例患者行方案2治疗。中位随访时间为12个月(6-17个月)。总体反应(OR)率和完全缓解(CR)率分别为(6/7)86% and(3/7)43%。中位起效时间为51天（20-152天）。在对治疗有反应的患者中,4人在随访期间复发，中位复发时间116天（30-210天），2人持续缓解。总体中位治疗反应持续时间为6个月（1-15.5月）。所有入组患者，HBsAg及HBeAg均为阴性；明确3个月内丙种球蛋白输注(IVIG)情况和输血情况的患者57例，其中34例HBcAb和/或HBeAb阳性。丙球暴露与HBeAb及HBcAb阳性检测结果相关(P＜0.05)。
结论：原发ITP患者对低剂量利妥昔单抗具有疗效，且耐受性良好；CTD-sITP患者对低剂量利妥昔单抗具有疗效；成人利妥昔单抗治疗的疗效优于儿童：甲状腺激素水平对成人及儿童原发性ITP的利妥昔单抗治疗效果均有一定影响；IVIG治疗有可能造成乙肝病毒检测的误判，需加强鉴别意识。