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第一部分有生物活性的人工神经导管的研究
目的:利用GDNF基因转染的雪旺氏细胞和PLGA管共培养构建具有生物活性的人工神经导管。
材料和方法:利用乳鼠臂丛神经和坐骨神经取材,双酶消化法培养雪旺氏细胞,经阿糖胞苷抑制成纤维细胞和差数贴壁,培养出高纯度和高浓度的雪旺氏细胞。PcDNA3.1(+)/GDNF质粒通过脂质体转入雪旺氏细胞。转染的雪旺氏细胞扩增达到一定数量后,用微注射和共培养法,与PLGA管构建有生物活性的人工神经导管。通过光镜和扫描电镜检测雪旺氏细胞的生长情况。
结果:成功培养出雪旺氏细胞,并转入GDNF基因。转染的雪旺氏细胞与PLGA管复合,构建出有生物活性的人工神经导管。
结论:GDNF基因转染的雪旺氏细胞可与PLGA管共同构建有生物活性的人工神经导管。
第二部分有活性的人工神经导管修复面神经的动物实验研究
目的:评价转染的雪旺氏细胞与PLGA管复合构建的人工神经导管在修复面神经缺损方面的优势。
材料与方法:将30只SD大鼠随机分成3组,分别用直接缝合(A组),未转染的雪旺氏细胞与PLGA管(B组),转染的雪旺氏细胞与PLGA管修复面神经缺损(C组)。术后2周,1月,2月,3月分别进行大体观察,检测手术侧的面神经肌电图,之后修复段取材,经H-E染色后,进行有髓神经纤维计数和髓鞘厚度测量。数据经SPSS11.5进行统计学分析。
结果:C组的面神经肌电图叫A,B组恢复快,且差异有统计学意义;A,B组之间神经肌电图无统计学差异。C组的有髓神经纤维计数和髓鞘厚度均较A,B组高,差异有统计学意义。
结论:GDNF基因转染的雪旺氏细胞复合PLGA管构建的具有生物活性的人工神经导管在修复面神经缺损方面优势明显。为临床上治疗面神经缺损提供了实验依据。