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猪圆环病毒2型(PCV2)感染抑制猪免疫反应,并伴随与其他病原体混合感染,严重危害养猪业。PCV2感染诱导细胞自噬和内质网应激,并通过PERK/e IF2α通路诱导未折叠蛋白反应(UPR),且细胞自噬和PERK/e IF2α通路的激活都有利于病毒增殖。近年来部分研究表明,UPR也参与细胞自噬的调控,然而PCV2感染是否通过PERK/e IF2α通路诱导细胞自噬还有待研究。此外,分子伴侣蛋白P58IPK可抑制PERK活性,负反馈调节PERK/e IF2α通路,且是PCV2衣壳蛋白(Cap)的潜在互作蛋白。鉴于此,本研究以宿主的UPR为切入点,探讨猪分子伴侣蛋白P58IPK对PCV2诱导的细胞自噬的作用与机理。主要的研究结果如下:1.PCV2感染通过PERK/e IF2α通路调控细胞自噬利用PERK特异性抑制剂和si RNA分别干扰PERK通路,PCV2感染24h后的ATG5-ATG12(0.32 vs 0.25,P<0.0001)及LC3-Ⅱ(0.23 vs 0.07,P<0.0001)的水平显著下调。说明PCV2感染通过PERK/e IF2α通路调控自噬水平。2.P58IPK通过PERK/e IF2α通路调控PCV2感染所诱导的细胞自噬分子伴侣蛋白P58IPK可抑制PERK活性,通过定量PCR检测证实PCV2感染24h时P58IPK m RNA表达显著升高(1.00 vs 1.62,P<0.0001),然而在12、48和72h时P58IPK m RNA表达低于对照。该结果表明在PCV2感染24h前后P58IPK表达受到抑制。过表达P58IPK显著下调PCV2感染24h后所诱导的p-e IF2α(0.051 vs 0.037,P<0.0001),ATG5-ATG12(0.07 vs 0.03,P<0.0001)及LC3-Ⅱ(0.30 vs 0.14,P<0.0001)的表达。说明过表达P58IPK可能通过抑制PERK活性进而下调PCV2感染诱导的自噬。综上所述,本研究不仅验证了PCV2感染诱导内质网应激、未折叠蛋白反应和细胞自噬,还阐明了PCV2感染通过PERK/e IF2α通路诱导细胞自噬,而过表达P58IPK可通过抑制PERK活性以抑制PCV2感染所诱导的自噬。该研究结果将为挖掘调控PCV2感染增殖的宿主(猪)基因提供参考,为研究病毒与宿主间的互作机理打下基础。