本研究是利用荧光原位杂交技术(fluorescent in situ hybridization, FISH)来对活性污泥中的微生物和分离培养的活性污泥微生物进行单色、同步双色及重复双色的检测,通过试验来摸索双色FISH杂交的方法。经过对影响杂交试验结果的几个主要因素的研究比较,得出以下结论:1适合用来进行荧光原位杂交的污泥浓度为250mg/L- 350mg/L,适宜探针PAO651的杂交条件为杂交温度46℃,杂交液甲酰胺浓度为40%,杂交时间为2.5小时。2使用2种探针杂交时,用重复多色法比同步多色法效果要好,即分别用探针与样品杂交的效果好于同时用探针与样品杂交的效果。3在用重复双色FISH法时,当两种探针的杂交温度,杂交液甲酰胺浓度等条件相近而杂交时间差异较大时可以在一种探针杂交完成后不经过洗涤就立刻进行再次杂交;而当两种探针杂交条件差异较大时,需在一种探针杂交完成后洗涤再进行再次杂交。