背景:食管癌是全世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,具有较高的致死率,每年导致超过40万人死亡。食管癌的分布情况和性别、年龄、职业、地域、人种、遗传易感性、生活环境、饮食生活习惯等有一定关联。其中饮食习惯被认为是食管癌发病相关性最强的因素,包括:进食过快过烫,长期干硬食物刺激或者过多霉变食物摄入等。目前的主要治疗方案包括手术治疗,放射治疗,化学治疗和靶向治疗。手术切除仍是其主要治疗方法,但5年总生存率仅为30%左右,术后的局部复发和转移以及患者免疫功能的下降体现了手术治疗的局限性。同时由于食管癌早期缺乏典型的临床症状,大部分的患者临床诊断时间较晚,据报道约有40%-60%的患者因分期较晚或高风险而不能接受手术治疗。传统的化疗药物对于食管癌的治疗作用不理想,近几十年随着顺铂和氟尿嘧啶类衍生物、奈达铂、希罗达、伊立替康等新药的应用,为食管癌的化疗提供了更多的可选择方案,在临床应用中起到了一定积极作用。放疗是局部进展患者的最佳治疗方案之一,自RTOG8501以来,放射治疗联合化疗已成为非手术食管癌患者的最佳治疗选择。在诸多治疗方法中,都存在治疗效果不理想、全身副反应大等不足,因此研究新的联合治疗方案以及寻找治疗食管癌的新药依然具有重要意义。人参是中国宝贵的中草药,人参皂苷是其发挥药理作用主要的成分。人参皂甙Rg5属于原人参二醇人参皂苷,已被证明具有显著的抗氧化、保护神经、提高免疫等保护机体作用。同时在体外实验中已经证实其对于乳腺癌细胞和宫颈癌细胞具有显著的抗肿瘤活性,但对于食管癌细胞作用和机制的研究较少。顺铂是目前应用最广泛的抗肿瘤药物,据统计约有70-80%的化疗方案中使用顺铂。该药物主要通过和肿瘤细胞DNA交联进而抑制其合成,蛋白质和RNA的合成也同样受到抑制。但在临床应用过程中,顺铂在起到抗肿瘤作用的同时表现出了明显的肾毒性、恶心呕吐和骨髓抑制等不良反应,这大大限制了顺铂的应用。提高用药疗效以及减轻治疗副反应是应用顺铂化疗临床工作重要的课题,人参皂苷Rg5和顺铂的联合应用是可选择的一种用药方案。目的:研究人参皂苷Rg5对于人食管癌细胞Eca-109凋亡影响的相关机制,同时研究顺铂联合人参皂苷Rg5对于人食管癌细胞Eca-109生长变化的影响和相互作用的机理。方法:传代培养人食管癌细胞Eca-109,应用CCK8法检测人参皂苷Rg5和顺铂对于Eca-109细胞增殖的影响,运用流式细胞仪检测人参皂苷Rg5和顺铂处理后Eca-109细胞的凋亡变化。使用不同浓度的人参皂苷Rg5处理Eca-109细胞,后用流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位变化,用共聚焦显微镜观察特定荧光探针染色后细胞浆游离钙离子的变化情况。使用Western blot法检测caspase3、caspase8、caspase9、Bax、Bcl-2、p-Akt等相关凋亡蛋白的变化情况。结果:1.人参皂苷Rg5和顺铂能抑制Eca-109细胞的生长,且呈剂量浓度依赖性。2.随着人参皂苷Rg5浓度的增加,Eca-109细胞线粒体膜电位降低,胞浆游离钙离子浓度增高。3.Western blot法检测蛋白结果提示人参皂苷Rg5处理后,细胞的c-caspase3、c-caspase8、c-caspase9的表达升高,Bcl-2、p-Akt的表达降低。4.人参皂苷Rg5联合顺铂处理细胞后抑制增殖和促凋亡作用均大于单独用药,并且呈相加效应。5.参皂苷Rg5联合顺铂处理后细胞的c-caspase3、c-caspase8、c-caspase9表达均高于单独用药,同时Bcl-2、p-Akt的表达均低于单独用药。结论:1.人参皂苷Rg5能够通过调控caspase家族和Bcl-2家族蛋白促进食管癌细胞凋亡,并且和下调PI3K/Akt信号通路中p-Akt表达有关;2.人参皂苷Rg5联合顺铂可以加强顺铂对于食管癌细胞抑制增殖作用和促进凋亡的作用;3.人参皂苷Rg5和顺铂的抗肿瘤协同作用可能和下调p-Akt和Bcl-2表达有关;