甘蓝型油菜磷高效NIL的发展与低磷特异QTL的初步分析

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油菜是全世界继大豆之后的第二大油料作物,我国以种植甘蓝型油菜为主。磷是植物生长发育所必需的大量营养元素,甘蓝型油菜需磷多,对磷敏感,其栽培地区恰巧处于我国土壤有效磷缺乏或严重缺乏的地区。因此,研究油菜磷效率的差异及其遗传特性,揭示油菜磷高效的分子和生理机制,为改良甘蓝型油菜磷效率提供基础,对促进油菜持续稳定的发展具有重要的意义。本论文以已经定位的甘蓝型油菜磷高效相关QTL及其低磷QTL置信区间内的分子标记为基础,对构建的回交群体BC4F1进行前景选择,筛选出含有目标QTL的磷高效株系,再选取覆盖全基因组的共显性标记对这些高效株系进行背景选择,检测其回复率,最后结合水培实验,对低磷胁迫下含有目标QTL片段且背景回复率高的株系进行生理指标分析。获得的主要结果如下:1.甘蓝型油菜BC4回交群体的构建以轮回亲本磷低效品种97009作为父本,BC3共28个株系作为母本进行杂交,构建BC4回交群体,获得包含195个株系的BE-BC4Ls。2.甘蓝型油菜BC4F1磷高效株系的前景选择以BC4F1195个株系的基因组DNA为模板,结合实验室由杨美整合得到的QTL结果,利用定位于低磷QTL置信区间内的SSR以及GBM(功能标记)对群体株系进行分析。检测到60个含有磷高效供体亲本97081基因型的株系。这些株系共包含15个低磷QTL,其中包括2个经整合后的低磷特异QTL:uq.A1和uq.C3a。uq.Al由两个低磷QTLqLP-RSA-A1a和qLP-RVol-A1a整合而来,共23个株系含有该QTL。uq.C3a由7个低磷qLP-RDW-C3a、qLP-SDW-C3a、qLP-TDW-C3a、QTLqLP-PU-C3a、 qLP-RL-C3a、qLP-RSA-C3aq和LP-RVol-C3a整合而来,仅2个株系含有该QTL。同时利用定位于高磷QTL置信区间内的SSR以及功能标记对群体株系基因型进行分析。检测到49个含有磷高效供体亲本97081基因型的株系,共含有6个QTL。3.甘蓝型油菜BC4F1磷高效株系的背景选择以BC4F1195个株系的基因组DNA为模板,结合实验室由丁广大进行加密的遗传连锁图谱,利用覆盖全基因组的95对引物对群体株系进行分析。检测到的位于低磷QTL置信区间内的含有供体亲本97081基因型的60个株系其背景回复率均大于95%,仅有14个株系略低于理论值96.875%,占总数的23%。而含有uq.C3a的2个株系的背景回复率均大于97%。4.甘蓝型油菜BC4F2磷高效株系的表型鉴定设置低磷胁迫下的水培实验,对含有uq.C3a的株系以及不含uq.C3a但其余背景相同的株系结合两亲本进行比较。结果发现,含ug.C3a的株系相比于不含uq.C3a的株系,其地上部、根系、总干重以及磷吸收累积量均较大,且达到显著水平,这表明该QTL在低磷胁迫下对植株生长以及磷的吸收具有一定的促进作用。但该株系在目标QTL区间内仍为高效供体亲本97081纯和子,且在A9染色体上还有未回复的QTL区段,若再经过一次回交,导入轮回亲本97009的基因片段形成杂合子,且消除其余QTL片段,则该株系与轮回亲本构成良好的NIL。
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